冬蟲夏草菌種油混懸劑的研究.pdf

1、冬蟲夏草(Cordyceps sinensis)是我國傳統(tǒng)的名貴中藥，因其含有特殊的化學(xué)成分而具有獨特的藥理作用，受到人們的青睞。由于天然冬蟲夏草資源的匱乏，人工培育冬蟲夏草便成為一個亟待解決的重要課題。在人工培育冬蟲夏草的環(huán)節(jié)中，冬蟲夏草菌制劑是關(guān)鍵的環(huán)節(jié)之一。為此，本實驗探討了配制冬蟲夏草菌油混懸劑的工藝配方以及優(yōu)化固體發(fā)酵條件與建立發(fā)酵動力學(xué)數(shù)學(xué)模型，為進(jìn)一步研究冬蟲夏草菌制劑和固體發(fā)酵生產(chǎn)分生孢子提供理論基礎(chǔ)。
　　 冬

2、蟲夏草人工培育中，接種侵染率一直是制約其規(guī)?；a(chǎn)的重要因素。本次試驗利用油混懸劑獨有的劑型特性可提高人工培育冬蟲夏草中的接種率，采用正交試驗設(shè)計，應(yīng)用數(shù)學(xué)軟件MATLAB極差分析法，根據(jù)綜合平衡法原則，篩選出冬蟲夏草菌油混懸劑最優(yōu)的組合方案，即菜籽油與鄰苯二甲酸二丁酯(7：3)復(fù)合油1Og，固液比1.O：10，十二烷基硫酸鈉0.9g、脂肪醇聚氧乙烯醚0.5g、硬脂酸鋁0.6g，其制劑的沉降體積比和再分散性分別高達(dá)97％和100％。穩(wěn)定

3、性試驗表明，該油混懸劑具有很好的貯藏穩(wěn)定能力，可保存1-2月。
　　 在冬蟲夏草菌油混懸劑研究的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步對油混懸劑的活力水平進(jìn)行了考察，研制高活力冬蟲夏草菌油混懸劑以推動其產(chǎn)業(yè)化的發(fā)展。根據(jù)油混懸劑的特殊性，對MTT法進(jìn)行改進(jìn)及優(yōu)化，結(jié)果為：反應(yīng)時間120 min、反應(yīng)溫度37℃、以甲苯為萃取劑，活細(xì)胞量與琥珀酸脫氫酶活力線性相關(guān)。依據(jù)該方法篩選制劑中助劑的種類及濃度，并通過正交試驗進(jìn)一步優(yōu)化，獲得冬蟲夏草菌種油混懸劑高活

4、力配方為：菌種量O.15 g/mL、硬脂酸鋁60 mg/mL、司班-8050μL/mL。經(jīng)活力水平實驗表明，油混懸制劑活力水平相對于純細(xì)胞來說保持在95％-89％之間，具有較高的細(xì)胞活力。通過穩(wěn)定性試驗表明，該制劑在4℃下保存1個月，活力水平仍能維持90％左右。
　　 對冬蟲夏草菌固體發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化。通過對比試驗結(jié)果得出：最佳碳源為葡萄糖，最佳氮源為酵母浸粉。同時，探討了冬蟲夏草菌在固體平面培養(yǎng)基上的動力學(xué)模型，利用MATL