番茄Vel基因在棉花中的功能驗(yàn)證.pdf

1、黃萎病是棉花的主要病害，嚴(yán)重影響棉花的產(chǎn)量。目前缺乏非常有效的途徑控制棉花黃萎病的發(fā)生。利用基因工程提高棉花尤其是陸地棉對(duì)黃萎病菌的抗性是選育陸地棉抗病種質(zhì)的重要方法。Ve1基因是在番茄中發(fā)現(xiàn)的控制黃萎病的主效基因，將Ve1進(jìn)行科間轉(zhuǎn)化擬南芥仍然能保持其抗病功能。本研究將人工合成的Ve1基因轉(zhuǎn)化本氏煙和陸地棉對(duì)其抗性功能進(jìn)行驗(yàn)證。
　　 將合成的Ve1基因轉(zhuǎn)化本氏煙(N.benthamiana)后，選用其中兩個(gè)表達(dá)量較高的煙草純

2、系接種國(guó)內(nèi)的棉花落葉型黃萎病菌“V991”和非落葉型黃萎病菌“1cd3-2”，但未見對(duì)黃萎病菌的抗性有明顯提高。隨后對(duì)煙草純系接種了國(guó)外黃萎病菌1號(hào)生理小種“JR2”和2號(hào)生理小種“M050414”。1號(hào)生理小種對(duì)煙草的致病力較強(qiáng)，煙草葉片變黃干枯，生長(zhǎng)受到抑制，同期接種2號(hào)生理小種的煙草卻只表現(xiàn)出部分葉片發(fā)黃的癥狀，生長(zhǎng)受影響較小。但轉(zhuǎn)基因系和野生型對(duì)這兩種黃萎病菌的抗性差異不明顯。檢測(cè)接種后煙草中Ve1介導(dǎo)信號(hào)路徑相關(guān)基因的表達(dá)水平

3、未也發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因系與野生型之間具有明顯差異。推測(cè)在本氏煙中可能不存在Ve1基因介導(dǎo)的抗黃萎病信號(hào)路徑。
　　 Ve1超表達(dá)載體轉(zhuǎn)化陸地棉YZ1后得到兩個(gè)轉(zhuǎn)錄水平較高的轉(zhuǎn)基因純系。將其接種“V991”后，轉(zhuǎn)基因系在表型和病指兩方面都沒有表現(xiàn)出對(duì)黃萎病菌的抗性有所增強(qiáng)，且下游信號(hào)路徑相關(guān)基因也并未被激活。由此可見，Ve1基因?qū)μ岣呙藁▽?duì)黃萎病菌的抗性的作用并不大。另外，接種實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)國(guó)外黃萎病菌1號(hào)生理小種“JR2”對(duì)棉花植株沒有致病力