茉莉酸甲酯對大豆根部茉莉酸和類黃酮合成的影響.pdf

1、茉莉酸甲酯（MeJA）作為一種信號分子，調節(jié)植物生長發(fā)育和誘導植物產生系統(tǒng)抗性。本實驗室前期研究表明，MeJA對大豆（Glycine max（L.）Merr.）結瘤有促進作用。為了了解外施MeJA是否影響根中一些物質的合成從而影響結瘤，本文通過基因表達分析和化學分析的方法探討豆科植物根部茉莉酸和類黃酮物質合成情況。
　　 在基因表達水平，我們選用大邑黑豆為材料，分別用不同濃度的MeJA（0、1、10和100 μM）噴施植株地上部

2、分，用RT-PCR法分析根中內源茉莉酸合成途徑丙二烯氧化物合成酶基因GmAOS和異黃酮合成途徑異黃酮合成酶基因GmIFS的表達情況。結果表明，100μM MeJA處理大豆能在一定時間內誘導根部的GmAOS表達；對照組、1 μM和10 μM處理組根部GmAOS基本不表達；GmIFS在處理前后都有表達。所以大豆外施MeJA，根部GmAOS基因表達呈現(xiàn)濃度和時間效應。
　　 在生理水平，通過頂空固相微萃取-氣相色譜（HS-SPME-G

3、C）和高效液相色譜（HPLC）的方法檢測不同濃度的MeJA噴施大豆地上部分后，根部MeJA、大豆苷元（Da）和染料木素（Ge）的含量變化。HS-SPME-GC檢測內源MeJA結果顯示，隨著處理天數(shù)的增加，MeJA含量大體呈逐漸下降的趨勢，MeJA處理能抑制內源MeJA下降速率。HPLC檢測類黃酮結果表明，Da和Ge含量大體呈逐漸上升的趨勢，其中10μM處理組的Da.和Ge含量明顯比對照組高。
　　 為了進一步了解MeJA對豆科植

4、物結瘤的作用機理，我們還選用了研究共生結瘤的模式植物百脈根（Lotus japonicas）為實驗的另一材料，首先克隆了百脈根MG-20茉莉酸合成途徑的關鍵酶基因LjAOS、LjAOC，LjLOX的片段，然后檢測MeJA處理后百脈根根部LjAOS和LjIFS基因表達情況。結果表明，克隆的百脈根茉莉酸合成途徑關鍵酶基因LjAOS、LjAOC、LjLOX片段和豆科植物苜蓿、大豆等相應基因具有較高的同源性，RT-PCR分析表明MeJA處理促進