松材線蟲攜帶菌纖維素酶理化特性研究.pdf

1、松樹萎蔫病是松屬植物的毀滅性病害。對于該病的成因，主要有‘線蟲學說’和‘菌蟲共同作用’兩種觀點。本研究以自長島松材線蟲(Bursaphelenchusxylophilus)體表分離得到的4株細菌為研究對象，通過纖維素酶的理化性質及組分測定，結合攜帶菌生物學特性分析，從病原物的侵襲力，包括侵入、定植和擴散能力的角度，對攜帶細菌致萎的酶學基礎和致病能力進行了分析研究，探究松樹萎蔫病的病因和機理。主要研究結果如下： 1、長島線蟲體表分

2、離物，經(jīng)鑒定分別為：蠟狀芽孢菌(Bacilluscereus)、魯氏不動桿菌(Acintobacterluoffi)、中間腸桿菌(Enterobacterintermedium)和嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌(Stemotrophomonasmaltrophilia)。與已報道的具有產(chǎn)解壁酶能力的菌種在種屬特性上存在一致性，且具有產(chǎn)酶能力。 2、生物學特性分析表明，線蟲體表同時攜帶有好氧菌和兼性菌，菌株間需氧情況的差異，與病原由表及里的侵染

3、過程相符，顯示其在致萎過程中具有協(xié)同作用。 3、攜帶細菌與致萎相關酶系的特性分析表明，細菌具備獨立分解纖維素和木質素的能力，并非依賴線蟲降解物生存，提示攜帶細菌與松材線蟲之間的關系不符合專性寄生或共生的生態(tài)關系，可理解為條件致病因子。 4、酶學性質分析表明，攜帶菌具有完整的纖維素降解酶系。細菌纖維素酶的最適pH值為8.5，最適反應溫度為50℃，在25℃～60℃范圍內，酶活力可保持在60％以上。其中Chx1分泌的CMC酶在

4、最適培養(yǎng)條件下酶活力可達237.328U，提示其在侵染初期對淺表組織細胞壁的分解起主要作用；而假單胞菌產(chǎn)生的纖維素酶主要表現(xiàn)為β-葡萄糖苷酶，具有植物內部的繼發(fā)作用特性。進一步的酶學特性、酶活力測定，以及電泳分析結果證實，不同菌株之間在酶系的組分和活力上都存在差異，在侵染和致萎過程中，顯示出時序性和生化協(xié)同的作用特點。 5、研究證實，不僅攜帶細菌具備侵染和致萎的酶學基礎，松材線蟲本身同樣也具備致萎的酶學基礎；綜合分析纖維素酶理化