三基訓練檢驗分冊

1、《醫(yī)學臨床“三基”訓練》 檢驗分冊(第四版）基礎理論、知識問答（281-315）,§5.2基礎理論和基本知識問答 281.簡述乳酸脫氫酶測定原理及注意事項。乳酸脫氫酶(I.DH)在輔酶I的遞氫作用下,使乳酸脫氫而生成丙酮酸。 L一乳酸+NAD+#j丙酮酸+NADH+H+ NAD十還原成NADH,引起340nm處吸光度的改變,其吸光度的增加速率與標本中LDt{濃度成正比。此法適應全自動生化儀連續(xù)監(jiān)

2、測。,若無條件連續(xù)監(jiān)測,可在反應后加入2,4一二硝基苯肼,與丙酮酸反應生成丙酮酸二硝基苯腙,在堿性環(huán)境中顯棕紅色。根據顏色深淺計算酶活力大小。 注意事項:①草酸、乙二胺四乙酸對本酶有抑制作用,故不宜使用。②紅細胞中乳酸脫氫酶含量較血清中約高100倍,故應避免溶血,并及時分離血清。,282.乳酸脫氫酶的順向反應和逆向反應各有什么優(yōu)點? 以乳酸為底物的反應稱為順向反應,以丙酮酸為底物的反應稱為逆向反應。 (1)順向反

3、應的優(yōu)點:①此法所需的氧化型輔酶I(NAD+)較逆向反應需用的還原性輔酶I(NlADH)穩(wěn)定,易得純品,含抑制I+DH的雜質少,價格也較低。②乳酸鈉(或乳酸鋰).底物比丙酮酸底物穩(wěn)定。③過量乳酸對I.DH的抑制低于過量丙酮酸對LDH的抑制。,(2)逆向反應的優(yōu)點:①NADI-{用量少,只是正向反應所用NAD+的3％。②酶反應速率也比乳酸鹽法快,單位時間內吸光度的變化較大,能使用比較少的樣品在較短的時間內進行測定。③酶活力隨時間的線性關系

4、較長。④用NADI-{或丙酮酸鹽啟動反應,其反應速度相同,而由乳酸鹽到丙酮酸鹽的反應中,I。DH活力取決于使用的啟動劑。,283.用lyr一谷氨酰一a一萘胺作基質測定|Ir—GT是根據什么原理?常用的顯色劑有哪幾種? y—GT‘作用于底物L一7氨酰一Q一萘胺,此底物既作為7一谷氨酰的供體,又作為受體,生成L一7一谷氨酰一L—y一谷氨酰一Q一萘胺和游離的Q一萘胺,后者與重氮化的對氨基苯磺酸反應,生成紅色的偶氮化合物,色澤的深淺與酶

5、活力成比例,與Q一萘胺標準液所顯的顏色進行比較,可以求得樣品中-),一GT的活力。,酶促反應生成的Q一萘胺,除用重氮化對氨基苯磺酸顯色外,還可用固藍B顯色,或將Q一萘胺重氮化后用N一萘基二氨基乙烯顯色。,284.試述血清淀粉酶碘一淀粉比色法測定原理及注意事項。 血清(或血漿)中Q一淀粉酶催化淀粉分子中Q一1,4葡萄糖苷鍵水解,產生葡萄糖、麥芽糖及含有Q一1,6糖苷鍵支鏈的糊精。在有足夠量基質的條件下,反應后加入的碘液與未被水解的

6、淀粉結合成藍色復合物,其藍色的深淺與未經酶促反應的空白管比較其吸光度,從而推算出淀粉酶的活力單位。,注意事項:①草酸鹽、枸櫞酸鹽、EDTA.一Na2及氟化鈉對淀粉酶活性有抑制,肝素無抑制作用。②酶活性在400U以下時與底物的水解量成線性,如測定管吸光度小于空白管吸光度一半時,應將血清量加大稀釋倍數或減少血清加人量,測定結果乘稀釋倍數。③本法亦適用于其他體液淀粉酶的測定。④唾液含高濃度淀粉酶,須防止混人。⑤淀粉溶液若出現(xiàn)混濁或絮狀物,不能

7、再使用。,285.試述血清淀粉酶酶法的測定原理。 葡萄脊6一磷酸+NADP-]一j墮塑奠生墮墮墮塑6一磷酸葡萄糖酸一NAD-.PH+H+ 在340nm處測定吸光度值的變化即可推算出AMS的濃度。,286.何謂同工酶? 同工酶指在同種屬生物、同一生物體、同一組織或器官,甚至同一細胞內具有相同催化活性,并以多種分子形式存在的酶。 ..,287.反映肝細胞損傷的酶類有哪些7 . 反映肝細胞

8、損傷的酶包括:轉氨酶(包括AI。T和AST)、異檸檬酸脫氫酶(ICD)、谷氨酸脫氫酶(G【.DH)、醇脫氫酶(ADH)、山梨醇脫氫酶(SDH)、鳥氨酸氨基甲酰轉移酶(()CT)、鳥嘌呤脫氨酶(GDA)、精氨酸代琥珀酸裂合酶(ASAI.,)、·血清膽堿酯酶(CH E),卵磷脂一膽固醇轉?；?I.CAT)等。,288.反映膽道梗阻的酶類有哪些? 反映膽道梗阻的酶類有堿性磷酸酶(AI。P)、氨肽酶、5’一核苷酸酶(5’NT

9、)、.),一谷氨酰轉肽酶(.),一GT)等。,289.用于診斷心肌梗死的主要血清酶有幾種? 主要有3種:AST、I.DH和CK以及它們的同工酶。 290.診斷胰腺疾病的主要血清酶有哪些? 主要有Q一淀粉酶和脂肪酶。Q一淀粉酶是診斷急性胰腺炎最常用的指標,一般在發(fā)病后2～12小時血清Q一淀粉酶活力開始上升,12～72小時達高峰,4天左右恢復正常。血清Q一淀粉酶升高常伴有尿淀粉酶增高,而且尿淀粉酶陽性率和升高程度都可

10、高于血清淀粉酶,維持時間也較長。急性胰腺炎時,血清脂肪酶活力升高,其增高程度可大于淀粉酶,可高于正常上限1 O倍以上,且持續(xù)時間較長,特異性較高。,291.診斷骨骼肌疾病時常測定的血清酶有哪些? 有CK、AI。D(醛縮酶)、AST、和I,DH。 292.常用的腫瘤標志酶有哪些? 常用的腫瘤標志酶有堿性磷酸酶(ALP)及其同工酶、酸性磷酸酶(ACP)及同工酶、5’一核苷酸酶(5’一NT)、|),一谷氨酰轉移酶(7一

11、GT)及同工酶、醛縮酶(AI。D)、磷酸己糖異構酶(PHI)、乳酸脫氫酶(I.,DH)及同工酶、芳香烴羥化酶(AHH)、Q一1,4葡萄糖苷酶及組胺酶等。,293.試述尿中17一酮類固醇測定原理及臨床意義。 尿中1 7一酮類固醇(17一KS)指尿中出現(xiàn)的所有C一1 7為酮基的類固醇類物質。尿中排出的內源性1 7一KS包括雄酮、異雄酮、脫氫異雄酮及其代謝產物等。17一KS是腎上腺皮質激素及雄性激素的代謝產物,大部分為水溶性的葡萄糖醛

12、酸酯或硫酸酯,必須經過酸的作用才能使其水解成游離的類固醇,再用有機溶劑提取,經過洗滌除去酸類與酚類物質。,17一酮類固醇分子結構中的酮一亞甲基(一CO—CH2一)能與堿性溶液中的間二硝基苯作用,生成紅色化合物。 尿17一酮類固醇增高見于腎上腺皮質功能亢進、肢端肥大癥和睪丸間質細胞腫瘤等,減低見于腎上腺功能減退、性功能減退以及某些慢性病如結核、肝病和糖尿病等。,294.試述尿中17一羥皮質類固醇測定原理及臨床意義o 1 7

13、一羥皮質類固醇(1 7-OHCS)為腎上腺皮質所分泌的激素,主要為皮質素及氫皮質素。測定尿中17一OI-tCS是指對尿中C-17上有羥基的所有類固醇類物質的測定。待測物在酸性條件下,用正丁醇抽提后再用稀堿處理,除去色素雜質,然后將正丁醇蒸干,用無水乙醇溶解抽提物,再與鹽酸苯肼的硫酸溶液作用而產生黃色,稱為Porter-Silber顏色反應。用同樣呈色的氫化可的松作標準液,以分光光度汁比色,而求得其含量。,17一()HCS增高見于腎上腺皮

14、質功能亢進,如庫欣綜合征、腎上腺皮質瘤及雙側增生、肥胖癥和甲狀腺功能亢進等,尤以腎上腺皮質腫瘤增生最為顯著。減少見于腎上腺皮質功能不全,如艾迪生病和西門癥。,295.用滴定法測定血漿(清)二氧化碳結合力(CQCP)應注意什么? (1)應立即分離血漿(清),并避免與空氣接觸。 (2)0.01mol／L氫氧化鈉不宜用鈉玻璃瓶儲存,且應密封,以避免從空氣中吸收C02。因0.01tool／I.,鹽酸較穩(wěn)定,故應每天作校正滴定,用

15、酚紅作指示劑,以出現(xiàn)紅色且10秒鐘不褪色為準進行質量監(jiān)測。,(3)所用器材及生理鹽水均應為中性。 (4)每次均應以生理鹽水加酚紅指示劑作為對照,觀察顏色變化。 296.血漿(清)二氧化碳結合力(∞lCP)與總二氧化碳(Tool2)有什么區(qū)別? T002是指血漿中以各種形式存在的C02的總含量,包括HC~雋的COz(95％)與溶解狀態(tài)的CO2等。C02 CP是指血漿中以HO蹶形式存在的COz含量,即100mI,血漿

16、中有多少毫升C02來自HC0。TC02參考值:動脈血為23～2 7mmol／L,靜脈血為24～29mmol／L。COz CP靜脈血為23～27mmol／L。,297.滴定法測定∞生CP的臨床意義如何? COzCP在反映代謝性酸堿平衡失調時,能較及時地反映體內堿儲量的增減變化。對呼吸性酸堿平衡失調時,不能及時反映血中C02的急劇變化。伴隨通氣障礙而發(fā)生的酸堿平衡失調的判斷,意義有限。目前血氣分析儀已廣泛使用,滴定法C02CP測定將

17、被取代。,298.血氣分析對血液樣品有什么要求?為什么? (1)因靜脈血來自身體的不同部位,而動脈血可反映全身情況,故血氣分析以動脈血為宜。 (2)采得的血液樣品必須嚴格隔絕空氣。因為空氣中的氧分壓高于動脈血,二氧化碳分壓低于動脈血,一旦接觸空氣可使血液中P02及PC()2都有改變而無測定價值。,3)血液樣品采集后必須立即檢測。如因故不能及時檢測,樣品必須置冰水浴中或冰箱內,但最長不能超過1個小時,因為血細胞在體外仍有糖

18、酵解作用,不斷消耗02產生C02和乳酸,使P0z和pH值下降而PC02上升。在冰箱中僅使其反應延緩而已。 (4)血液必須抗凝,以防止血氣分析儀中毛細管道被阻塞?？鼓齽x用肝素(濃度為1000U／mL或10mg／mL,溶于生理鹽水)。將肝素0.2m1.,抽人針筒內反復抽動,使針管全部濕潤,將多余肝素全部排出,注射器內殘留肝素即可抗凝。,299.血氣分析儀直接測得的參數有哪幾個?還可運算出哪些參數?直接測得的參數有3個:pH值、

19、二氧化碳分壓(P(弛)、氧分壓(P(_)2)。 其他參數:根據儀器性能不同,一般可測出氧飽和度(Sat02)、二氧化碳總量(TOD2)、實際碳酸氫根(AB)、標準碳酸氫根(SB)、緩沖堿(BB)、剩余堿(BE)、肺泡一動脈氧分壓差(A—aI]02)等。,300.試述離子選擇電極【lSE)法測K、Na、CI的原理o . 離手選擇電極分析法是以測量電池電動勢變化為基礎的定量分析法。將離子選擇電極和一個參比電極連接即構成

20、一個測量電池。將測量電池置于待測的電解質溶液中,由于離子活度不同而產生不同的電動勢變化,這種變化與溶液中的離子濃度成正比,通過能斯特(Nernst)方程即可求出離子濃度。,301.簡述血清總鈣和離子鈣測定原理o (1)血清總鈣測定原理:是利用血清中的鈣離子在堿性溶液中可與染料結合生成有色物質來測定。常用染料有甲基麝香草酚藍(MTB)和鄰甲酚酞絡合酮(OCPC)。同時在試劑中加人8一羥基喹啉,可以消除鎂離子的干擾。而偶氮砷Ⅲ法則是

21、利用在中等酸度(pH值約為6)時偶氮砷Ⅲ與鈣離子的親和性遠大于鎂離子的特性來測定。,(2)離子鈣測定原理:采用離子選擇電極法測定。鈣離子選擇電極包括一層含有內置參考電極的鈣離子選擇膜和氯化鈣內部參考溶液。該內部參考溶液常常含有飽和氯化銀和生理濃度的氯化鈉和氯化鉀。外置參考電極與樣品通過液體一液體或氯化鉀／甲酸鈉鹽橋連接組成化學電池。根據能斯特(Nernst)方程,電池兩側的電位差與離子鈣濃度的對數成正比。,302.簡述體內鈣離子的生理功

22、能。 體內鈣離子的生理功能包括:①血漿鈣離子可降低毛細血管和細胞膜的通透性和降低神經肌肉的興奮性;②作為血漿凝血因子Ⅵ參與凝血過程并有對多種凝血因子的激活;③在骨骼肌中的鈣離子可引起肌肉收縮;④起重要調節(jié)作用包括作用于質膜影響其通透性及膜的轉運;⑤在細胞內作為第二信使起著重要的代謝調節(jié)作用。,303.簡述速率法測尿素(1嘞)的測定原理。 尿素在脲酶的作用下,水解生成氨和二氧化碳。氨在a一酮戊二酸和還原型輔酶I存在下,經谷

23、氨酸脫羥酶(GI.DI-{)催化生成谷氨酸。同時,還原型輔酶I被氧化成氧化型輔酶I。還原型輔酶I在340nm波長處有吸收峰,其吸光度下降的速率與待測樣品中尿素含量成正比。,304.簡述苦昧酸和酶法測肌酐的原理。 血清中的肌酐與堿性苦味酸反應,生成黃紅色的苦味酸肌酐復合物,在510nm波長處進行比色測定。吸光度的升高與肌酐含量成正比。 酶法測肌酐是利用特異性的肌酐水解酶將肌酐水解,再檢測其水解產物(NH3、肌酸等),以求得

24、肌酐含量。酶法測肌酐的特異性要比苦味酸法高,結果也準確,缺點是酶法試劑價格昂貴。,305.血糖的利用途徑有哪些? 血糖的利用途徑有:①有氧氧化或無氧酵解功能。②在肝和肌肉細胞內合成糖原。③轉化為甘油脂肪酸合成脂肪。④轉化為氨基酸合成蛋白質。⑤轉化為其他糖類或衍生物。,306.胰高血糖素的作用有哪些? 胰高血糖素的作用有:①促進葡萄糖通過肌肉和細胞的轉運率加快,使組織攝取葡萄糖增多。②促進葡萄糖磷酸化和氧化分解。③抑制糖異生關鍵酶

25、而使異生減少。④促進葡萄糖合成糖原、蛋白質和脂肪。,307.糖尿病性糖耐量降低有哪些表現(xiàn)? 糖尿病性糖耐量降低的表現(xiàn)有:①空腹葡萄糖濃度>8.Ommol／L。②葡萄糖峰值>10.Ommol／L并出現(xiàn)糖尿。③延遲(2小時后)才回復到空腹水平。,308.有哪些原因可導致低蛋白血癥? 下列原因可導致低蛋白血癥:①蛋白質合成減少。②營養(yǎng)不良或吸收不良。③遺傳缺陷。④蛋白質異常丟失。⑤組織損傷或炎癥。⑥清蛋白分布異常。

26、,309.載脂蛋白的作用有哪些? 載脂蛋白的作用有:①參與組織或細胞間脂類的運輸和分配。②維持脂蛋白顆粒的結構。③能與細胞膜上特異的受體結合影響脂類的攝取。,310.引起繼發(fā)性高脂血癥和高脂蛋白血癥的原因有哪些? 引起繼發(fā)性高脂血癥和高脂蛋白血癥的原因有:肥胖、嗜酒、腎病、肝病、糖尿病、藥物及內分泌功能紊亂。,311.尿酸生成過多的因素有哪些? 尿酸生成過多的因素有:①來源過多。食物嘌呤來自有核蛋白,經小腸一系列

27、酶的作用,降解為嘌呤堿而吸收。②嘌呤代謝紊亂。③罕見的遺傳性疾病,多由于單一酶缺陷所致。,312.寫出均數、標準差、標準誤及變異系數的符號、公式及意義o (1)均數:符號為又。均數代表一組觀察值的集中趨勢。 (2)標準差:符號為s。標準差代表一組觀察值的離散程度。 (3)標準誤:符號為&或SE。標準誤是樣本均數的標準差,即樣本均數與總體均數的接近程度。,(4)變異系數:又稱離散系數,符號為CV。變異

28、系數是相對數,沒有單位,因此更便于資料之間的分析比較。CV常用于比較均數相差懸殊的幾組資料的變異度,或比較度量衡單位不同的幾組資料的變異度。 CV一號×100％,313.如何計算抗體的平均滴度?采用幾何均數法:314.如何進行兩均數的顯著性檢驗? 進行顯著性檢驗可用￡檢驗法,不同類型的資料可用不同的方法。常用樣本均數與總體(理論)均數的比較、配對資料的比較、兩個樣本均數的比較及兩樣本含量較大時的比較。兩個樣