對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類局麻藥物的分析

1、第八章　對(duì)氨基苯甲酸酯類和酰苯胺類局麻藥物的分析,1,第一節(jié) 對(duì)氨基苯甲酸酯類和酰苯胺類藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì),2,,對(duì)氨基苯甲酸酯類藥物基本結(jié)構(gòu)與典型藥物特點(diǎn)：,代表藥物有：,3,,,,鹽酸普魯卡因,苯佐卡因,鹽酸丁卡因,結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：,4,,苯胺?；苌?，酰胺基鄰位或?qū)ξ挥腥〈?,二、酰苯胺類藥物基本結(jié)構(gòu)與典型藥物,,代表藥物有：,5,,,鹽酸利多卡因,鹽酸布比卡因,三、主要理化性質(zhì)：,6,1.  芳伯氨基特性：具有芳伯氨基

2、，可發(fā)生重氮化—偶合反應(yīng)；可與芳醛發(fā)生縮合反應(yīng)，易氧化變色。,2.  酯鍵水解特性：具有酯鍵，易發(fā)生水解。水解的快慢受光線、溫度或堿性條件影響。,3. 弱堿性：脂烴胺側(cè)鏈為叔胺氮原子，故具有弱堿性；可與生物堿沉淀劑發(fā)生沉淀反應(yīng)；可在非水溶劑中被滴定4. 與重金屬離子反應(yīng)：酰胺氮原子與銅離子、鈷離子配位形成有色沉淀。5. 吸收光譜特性：紫外吸收、紅外吸收,第二節(jié)、鑒別試驗(yàn)一、重氮化-偶合反應(yīng) 具有芳伯氨基藥物，如鹽

3、酸普魯卡因等，在酸性溶液中與NaNO2發(fā)生重氮化反應(yīng)，再與堿性?-萘酚偶合產(chǎn)生紅色偶氮化合物。,7,8,橙紅色沉淀,鹽酸丁卡因（芳香第二胺結(jié)構(gòu)）與NaNO2作用生成乳白色N-亞硝基化合物沉淀，可與芳伯胺基的同類藥物區(qū)別。,9,10,,,與銅離子的反應(yīng),與鈷鹽反應(yīng),二、與金屬離子的反應(yīng) 具有烴胺側(cè)鏈，與生物堿沉淀劑反應(yīng)，根據(jù)沉淀顏色或測(cè)定沉淀熔點(diǎn)進(jìn)行鑒別。,11,鹽酸普魯卡因胺的鑒別反應(yīng)-羥肟酸鐵的反應(yīng),12,,具有芳酰胺結(jié)構(gòu)，被H

4、2O2氧化成羥肟酸，羥肟酸與FeCl3反應(yīng)生成紫紅色羥肟酸鐵，隨即變?yōu)榘底厣磷睾谏?。如鹽酸普魯卡因胺。,具有酰胺結(jié)構(gòu)的藥物,羥肟酸,羥肟酸鐵,13,三、水解產(chǎn)物反應(yīng),鹽酸普魯卡因的鑒別,14,,苯佐卡因的水解反應(yīng),15,,,四、制備衍生物測(cè)熔點(diǎn),三硝基苯酚衍生物,16,鹽酸利多卡因 ChP（2010）[鑒別] 取本品0.2g，加水20ml溶解。取溶液10ml，加三硝基苯酚試液10ml，即生成沉淀；濾過(guò)，沉淀用水洗滌后，干

5、燥，依法測(cè)定，熔點(diǎn)為228～232℃，熔融時(shí)同時(shí)分解。,17,,利多卡因和布比卡因,硫氰酸鹽衍生物,鹽酸丁卡因 ChP（2010） [鑒別]（1）取本品約0.1g，加5%醋酸鈉溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸銨溶液1ml，即析出白色結(jié)晶；濾過(guò)，結(jié)晶用水洗滌，在80℃干燥，依法測(cè)定（附錄ⅥC），熔點(diǎn)約為131℃。,18,,五、吸收光譜特性,1.紫外吸收光譜鹽酸布比卡因 [鑒別]（2）取本品，精密稱定，按干燥品計(jì)算，加

6、0.01mol/L鹽酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附錄ⅣA）測(cè)定，在263nm與271nm的波長(zhǎng)處有最大吸收；其吸收度分別為0.53－0.58與0.43－0.48。,19,2.紅外吸收光譜法,20,利用化合物結(jié)構(gòu)中特殊基團(tuán)的振動(dòng)和轉(zhuǎn)動(dòng)等紅外活性振動(dòng)產(chǎn)生的紅外吸收峰對(duì)藥物進(jìn)行鑒別的方法。,基本原理：在流動(dòng)相總加入與呈解離狀態(tài)的待測(cè)組分離子電荷相反的離子對(duì)試劑，兩者形成中性離子對(duì)化合物，增加了被測(cè)樣品組分在固定相中

7、的溶解度，使被測(cè)組分的分配系數(shù)增大，達(dá)到樣品組分分離測(cè)定的目的。 反相離子對(duì)色譜：分析酸類或帶負(fù)電荷的藥物時(shí)，常用季胺鹽如四丁基銨作離子對(duì)試劑，分析堿類或帶正電荷的藥物時(shí)，常用磺酸鹽類如庚烷磺酸鹽和烷基硫酸鹽類如十二烷基硫酸鹽等。,反相離子對(duì)高效液相色譜法,第三節(jié)、特殊雜質(zhì)與檢查一、鹽酸普魯卡因中對(duì)氨基苯甲酸的檢查：離子對(duì)HPLC法,離子對(duì)的濃度：是控制反相離子對(duì)色譜溶質(zhì)保留值的主要因素，通常對(duì)離子的濃度為3?20mmol/L。

8、 流動(dòng)相pH的選擇：調(diào)解流動(dòng)相的pH值可在較大范圍內(nèi)，改變?nèi)跛峄蛉鯄A樣品的保留值和分離選擇性。通常測(cè)定酸性物質(zhì)時(shí)調(diào)至pH7?7.5；測(cè)定堿性藥物時(shí)調(diào)至pH3?3.5。,影響離子對(duì)形成的因素：反離子種類、濃度、流動(dòng)相的組成、pH及離子強(qiáng)度,二、鹽酸普魯卡因注射液中有關(guān)物質(zhì)和光解產(chǎn)物的檢查：LC-MS法三、鹽酸利多卡因注射液中2,6-二甲基苯胺及其它雜質(zhì)的檢查：HPLC法四、鹽酸羅哌卡因的光學(xué)純度檢查：HPCE,23,第四節(jié)、含量測(cè)定

9、一、亞硝酸鈉滴定法1.  原理 具有芳伯氨基藥物，在酸性條件下與NaNO2反應(yīng)生成重氮鹽，根據(jù)消耗NaNO2量，計(jì)算出含量。潛在芳伯氨基藥物，如芳酰氨基、硝基等，可先水解或還原，得芳伯氨基后，再進(jìn)行測(cè)定。,24,25,,,,處理后亞硝酸鈉滴定測(cè)定含量一般較少采用,2.  操作中的主要條件滴定反應(yīng)特點(diǎn)：重氮化反應(yīng)屬于分子反應(yīng)滴定液NaNO2及反應(yīng)生成的重氮鹽都不穩(wěn)定反應(yīng)速度受多種因素影響：溫度、速度等,

10、26,,第一步反應(yīng)速度比較慢，而后兩步反應(yīng)速度則比較快。,27,,（1）加入溴化鉀加快反應(yīng)速度,重氮化反應(yīng)機(jī)制：,加入KBr（催化劑），HBr與HNO2反應(yīng)，可生成大量NOBr，加快反應(yīng)速度。,28,,,,K1比K2大300倍,（2）加過(guò)量鹽酸加速反應(yīng) 理論上:芳胺∶鹽酸＝1∶1mol 實(shí)際上:芳胺∶鹽酸＝1∶2.5?6mol,29,原因： 強(qiáng)酸性可加速反應(yīng) 重氮鹽在酸性下穩(wěn)定 酸性下避免副反應(yīng)發(fā)生。,如鹽酸

11、濃度太大，會(huì)使游離芳伯氨的量減?。ǔ甥}），而影響重氮化反應(yīng)速度，使反應(yīng)速度減慢。,30,如酸度不足則沒(méi)反應(yīng)的芳胺與生成的重氮鹽產(chǎn)生偶氮氨基化合物，而影響測(cè)定結(jié)果。,（3）反應(yīng)溫度 一般，溫度升高反應(yīng)速度加快。但重氮化反應(yīng)所生成的重氮鹽不穩(wěn)定，溫度升高重氮鹽分解速度也加快。另外，溫度高時(shí)，滴定液亞硝酸鈉也容易分解逸失，而影響測(cè)定結(jié)果。所以，重氮化反應(yīng)應(yīng)在低溫條件下進(jìn)行。,31,（4）滴定速度 重氮化反應(yīng)屬分子反應(yīng)，反應(yīng)速度比

12、較慢，滴定速度不能過(guò)快。 尤其是近終點(diǎn)時(shí)，更要慢慢地滴定。近終點(diǎn)時(shí)，游離芳伯胺濃度非常低，反應(yīng)速度更慢。所以，每加一滴滴定液，要攪拌1?5分鐘后再判斷終點(diǎn)。,32,中國(guó)藥典規(guī)定：在30?C以下，把滴定管尖端插入液面下2/3處進(jìn)行滴定。在滴定時(shí)一邊攪拌一邊加入大部分標(biāo)準(zhǔn)溶液。,33,到近終點(diǎn)時(shí)把滴定管提出液面，用水沖洗后再繼續(xù)滴定至終點(diǎn)。,標(biāo)準(zhǔn)溶液在液面下加入，可避免HNO2揮發(fā)。,3.  指示終點(diǎn)的方法 重氮化滴

13、定法指示終點(diǎn)的方法有: 永停法 電位法 外指示劑法 內(nèi)指示劑法,34,,我國(guó)藥典主要采用永停滴定法指示終點(diǎn),35,(1) 永停滴定法 溶液 檢流計(jì) 終點(diǎn)前： 無(wú)過(guò)量 無(wú)電流 HNO2 終點(diǎn)時(shí)：有過(guò)量 有電流（使指針偏離零

14、 HNO2 永停在某一位置） (2) 外指示劑法 用KI-淀粉指示劑 指示終點(diǎn)的原理： 2NaNO2 + 2KI + 4HCl 2NO + I2 + 2KCl + 2NaCl + 2H2O,,,,,,,,,二、非水溶液滴定法 脂烴胺側(cè)鏈

15、，具弱堿性,可非水滴定測(cè)定含量,三、紫外分光光度法 對(duì)乙酰氨基酚在0.4％氫氧化鈉溶液中，于257nm波長(zhǎng)處有最大吸收，其紫外吸收光譜特征，可用于其原料及其制劑的含量測(cè)定。,36,四、HPLC法 對(duì)乙酰氨基酚泡騰片、注射劑 可同時(shí)測(cè)定藥物及其降解產(chǎn)物；外標(biāo)法定量,第五節(jié) 體內(nèi)藥物分析 高效毛細(xì)管電泳法測(cè)定血漿中普魯卡因、利多卡因、丁卡因和布比卡因。,37,38,,高效毛細(xì)管電泳測(cè)定幾種局麻藥,電泳分析條件：