藥物對(duì)離體豚鼠回腸收縮的作用

1、目 的,學(xué)習(xí)離體小腸平滑肌的制備和灌流。觀察小腸平滑肌的自律性收縮，理解其原理。觀察藥物acetylcholine (Ach、乙酰膽堿），histamine (His、組胺），BaCl2分別對(duì)離體豚鼠回腸平滑肌的作用，并以atropine(阿托品)、chlorpheniramine(氯苯那敏、撲爾敏）為工具藥，初步分析以上藥物的作用原理。,原 理（1）,胃腸平滑肌收縮的自動(dòng)節(jié)律性（慢波理論：Cajal細(xì)胞的生電性鈉泵活動(dòng)的結(jié)果）

2、。,原 理（2）,乙酰膽堿：M膽堿能受體激動(dòng)藥。Ach與M受體結(jié)合，使平滑肌Ca2+通道開(kāi)放，Ca2+內(nèi)流↑，肌漿[Ca2+]↑，平滑肌收縮幅度增高。阿托品：M膽堿能受體阻斷藥。阿托品與平滑肌細(xì)胞膜M受體結(jié)合，阻斷乙酰膽堿與M受體結(jié)合，阻斷乙酰膽堿與M受體的激動(dòng)作用。,原 理（2）,組胺：激動(dòng)平滑肌細(xì)胞膜H1受體，通過(guò)激活G蛋白-磷脂酶C系統(tǒng)，使細(xì)胞內(nèi)Ca2+增高，導(dǎo)致平滑肌收縮。撲爾敏：H1受體阻斷藥。撲爾敏與平滑肌細(xì)胞膜H1

3、受體結(jié)合，阻斷組胺與H1受體結(jié)合，從而阻斷組胺對(duì)H1受體的激動(dòng)作用。,原 理（3）,氯化鋇：肌肉興奮劑。Ba2+經(jīng)鈣通道進(jìn)入胞漿，使肌漿[Ba2+]↑，平滑肌收縮幅度增高，但泵出障礙；另一方面BaCl2能興奮膽堿能受體，使平滑肌收縮幅度增高。,材 料,豚鼠1只：WT為300 g左右麥?zhǔn)显〔?，生物信?hào)采集系統(tǒng)，張力換能器。臺(tái)氏液， 10-2 g/L乙酰膽堿 、1 g/L硫酸阿托品、 10-2 g/L組胺， 10-3 g/L撲爾敏、

4、10 g/L BaCl2 溶液。,方 法,1. 實(shí)驗(yàn)裝置準(zhǔn)備：打開(kāi)恒溫水浴37℃---加臺(tái)氏液于麥?zhǔn)显〔壑?--95% O2+5%CO2持續(xù)通氣（氣泡一個(gè)個(gè)逸出為宜）。2. 標(biāo)本準(zhǔn)備：擊昏豚鼠---開(kāi)腹---減取回腸---沖洗內(nèi)腔---截取腸段--- 腸段兩端對(duì)角穿線--- 固定于麥?zhǔn)显〔酆蛽Q能器上。3. 實(shí)驗(yàn)記錄：打開(kāi)配置（藥物對(duì)離體豚鼠回腸的作用）---零點(diǎn)設(shè)置---調(diào)節(jié)換能器張力2 g ---穩(wěn)定10-30分鐘（基線和

5、收縮幅度穩(wěn)定）,,,找到盲腸，在離回盲部1cm處剪斷，取出回腸約10cm左右一段，置于盛有冰冷臺(tái)氏液的培養(yǎng)皿中，沖洗干凈，將回腸剪成1-1.5cm的幾小段。,標(biāo)本準(zhǔn)備（1）,標(biāo)本準(zhǔn)備（2）,取一段腸管置于盛有臺(tái)氏液的培養(yǎng)皿中，在其兩端對(duì)角處分別用縫針穿線，并打結(jié)。一端系于浴槽固定鉤上，另一端系在張力換能器的懸臂梁上。,換能器,腸管,,觀察項(xiàng)目,記錄腸段基礎(chǔ)張力，收縮張力，收縮頻率。加入10-2 g/L Ach 0.2ml，觀察并記錄曲

6、線，作用明顯時(shí)換液。重復(fù)以上Ach劑量，待收縮到最高點(diǎn)時(shí)加入1 g/L阿托品 0.2ml，觀察曲線，此時(shí)不換液，待曲線基本穩(wěn)定后，再加入相同量的Ach，觀察并記錄收縮曲線，換液。加入10-2 g/L組胺 0.3ml，作用明顯時(shí)迅速換液。預(yù)先加入10-2 g/L撲爾敏0.2 ml，5 min后（不換液）加入同量組胺，觀察并記錄收縮曲線 ，換液。加入10 g/L BaCl2 溶液1ml，當(dāng)作用達(dá)到最高點(diǎn)，加入1 g/L阿托品 0.2

7、 ml，觀察并記錄收縮曲線。,實(shí)驗(yàn)結(jié)果,Ach 換液 Ach 阿 Ach 換液 His 換液 撲 His Bacl2 阿 (每次換液后穩(wěn)定15m

8、in),,,,,,,,,,,,,,,,,,穩(wěn)定20min,,,,注意事項(xiàng),注意保持腸管通暢，勿使其封閉。不要把藥物直接滴加到回腸上。每次加的臺(tái)氏液量保持相等。加的臺(tái)氏液量必須預(yù)先加熱到37℃。藥物作用明顯后，盡早沖洗。每次換液后穩(wěn)定10－20min。,實(shí)驗(yàn)結(jié)果（1）,曲線描記：標(biāo)上加藥時(shí)間點(diǎn)，藥物名，洗脫時(shí)間點(diǎn)。對(duì)曲線進(jìn)行測(cè)量：基礎(chǔ)張力，收縮張力。填入表格。,實(shí)驗(yàn)結(jié)果（2）,表3. 藥物對(duì)離體豚鼠回腸平滑肌張力的影響組

9、別 標(biāo)本數(shù) 基礎(chǔ)張力（g） 收縮幅度（g）乙酰膽堿阿托品+乙酰膽堿組胺撲爾敏+組胺BaCl2BaCl2+阿托品,,,,實(shí)驗(yàn)報(bào)告,針對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，進(jìn)行結(jié)果描述 總結(jié)Ach、阿托品、His、撲爾敏、BaCl2分別對(duì)離體豚鼠回腸有什么作用。2. 討論和結(jié)論 分析Ach、阿托品、His、撲爾敏、BaCl2對(duì)離體豚鼠回腸平滑肌的作用