關(guān)于殼寡糖對(duì)鐵皮石斛原球莖生長(zhǎng)及多糖含量的影響的畢業(yè)論文

1、1殼寡糖對(duì)鐵皮石斛原球莖生長(zhǎng)及多糖含量的影響殼寡糖對(duì)鐵皮石斛原球莖生長(zhǎng)及多糖含量的影響生物與化學(xué)工程系生物與化學(xué)工程系生物技術(shù)專業(yè)生物技術(shù)專業(yè)學(xué)號(hào)學(xué)號(hào)指導(dǎo)教師指導(dǎo)教師【摘要】以鐵皮石斛原球莖為原材料，通過(guò)在含不同濃度殼寡糖的培養(yǎng)基中培養(yǎng)后，研究殼寡糖對(duì)鐵皮石斛的以鐵皮石斛原球莖為原材料，通過(guò)在含不同濃度殼寡糖的培養(yǎng)基中培養(yǎng)后，研究殼寡糖對(duì)鐵皮石斛的原球莖增殖及其多糖含量的影響。結(jié)果表明在較低的殼寡糖濃度下，殼寡糖促進(jìn)鐵皮石斛多糖的含量的

2、積累，則高濃原球莖增殖及其多糖含量的影響。結(jié)果表明在較低的殼寡糖濃度下，殼寡糖促進(jìn)鐵皮石斛多糖的含量的積累，則高濃度則抑制其多糖的增加。實(shí)驗(yàn)中，鐵皮石斛的生長(zhǎng)量隨著殼寡糖濃度的升高而減少，在度則抑制其多糖的增加。實(shí)驗(yàn)中，鐵皮石斛的生長(zhǎng)量隨著殼寡糖濃度的升高而減少，在0.1mgL0.1mgL的殼寡糖濃度下，其的殼寡糖濃度下，其多糖含量最高達(dá)多糖含量最高達(dá)30.84%30.84%，超過(guò)，超過(guò)0.1mgL0.1mgL則多糖含量減少。則多糖含量

3、減少?！娟P(guān)鍵詞關(guān)鍵詞】鐵皮石斛；原球莖；殼寡糖；苯酚鐵皮石斛；原球莖；殼寡糖；苯酚硫酸法；多糖含量硫酸法；多糖含量鐵皮石斛DendrobiumcidumWall.exLindl為蘭科石斛屬植物，具有滋陰清熱、生津益胃、潤(rùn)肺止咳等功能，用于陰傷津虧，口干煩渴，食少干嘔，病后虛熱，目暗不明，是我國(guó)重要的出口藥材之一。鐵皮石斛主要成份是多糖，還含有少量的單糖，生物堿，氨基酸，酚類，揮發(fā)油等[12]。由于目前資源，價(jià)格昂貴，有許多的人已經(jīng)開(kāi)始了

4、人工繁殖。歷史上，已經(jīng)有許多人對(duì)鐵皮石斛多糖含量進(jìn)行過(guò)測(cè)定，如黃民權(quán)從愈傷組織中提取多糖[3]。鐵皮石斛有三種多糖，它們?yōu)橐活怬一乙酰葡萄甘露聚糖鐵皮石斛多糖的藥理作用廣泛，主要有增強(qiáng)免疫力、抗腫瘤、降血糖等作用[4]。殼寡糖用大、生物活性高的低分子量產(chǎn)品，較殼聚糖具有更高的溶解度、更容易被生物體吸收等功能[5]。殼寡糖可作為植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，增強(qiáng)植物對(duì)病蟲害的防御能力[6]，促進(jìn)次生代謝產(chǎn)物的積累具有殺菌菌活性（抗菌、抑菌）[7]，提高

5、殺蟲活性與趨避活性[8]等。本研究主要探討在鐵皮石斛原球莖組培過(guò)程中殼寡糖對(duì)原球莖生長(zhǎng)以及多糖含量的影響，為石斛生物制藥生產(chǎn)和積累次生代謝產(chǎn)物的配方優(yōu)化提供依據(jù)。1材料與儀器1.1材料鐵皮石斛原球莖：由組培室提供培養(yǎng)；殼寡糖：購(gòu)于浙江金殼生物化學(xué)有限公司，產(chǎn)品批號(hào)為D120510097，分子量為100萬(wàn)；6BA、NAA：國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；石油醚、無(wú)水乙醇、丙酮、乙醇（95％、80％）、0.1％活性炭、苯酚、鋁片、NaHCO3、葡

6、萄糖、濃硫酸1.2儀器無(wú)菌培養(yǎng)室，超凈工作臺(tái)，高壓滅菌鍋，培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)皿，解剖刀及鑷子，濾紙，容量瓶，移液管，燒杯，量筒，電子天平，剪刀，棉線，報(bào)紙、索式提取器、蒸餾裝置(蒸餾瓶、溫度計(jì)、冷凝管、接收器）、容量瓶、移液管、漏斗、濾紙、水浴鍋；紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)：福州精科儀器公司（日本島津）UV17502、方法2.1鐵皮石斛的培養(yǎng)接種前，先將培養(yǎng)瓶稱重，記錄其重量。后將鐵皮石斛原球莖分別接入含不同濃度殼寡糖的培養(yǎng)基中（表1），每個(gè)培養(yǎng)基接

7、3~4個(gè)小原球莖，接20瓶。接種后，將培養(yǎng)瓶再次稱量，算出接入鐵皮石斛的接種量。40天后，取出鐵皮石斛再次稱量，比較不同濃度的殼寡糖對(duì)鐵皮石斛原球莖生長(zhǎng)的影響。3多糖含量％=（Cs.D.fw）100式中Cs為供試品溶液葡萄糖濃度(mg／mL)，D為供試品溶液的稀釋因素，f為換算因素，w為供試品重量(mg)。3結(jié)果與分析3.1不同濃度殼寡糖對(duì)鐵皮石斛生長(zhǎng)的影響表2不同濃度殼寡糖對(duì)中鐵皮石斛生長(zhǎng)的影響編號(hào)殼寡糖濃度(mgL)平均增長(zhǎng)倍數(shù)健壯

8、度顏色增殖效果1234500.11.0101006.1247B6.7010A5.9324C2.3197D2.1479E深綠伴淺綠深綠伴淺綠淺綠淺綠淺綠注：“”表明程度。培養(yǎng)40天后，測(cè)定其增長(zhǎng)倍數(shù)，用LSD法測(cè)定定差異顯著性（p=0.05）。字母相同者表示差異不顯著，字母不相同者差異顯著，以下表格相同。經(jīng)表1中不同濃度殼寡糖培養(yǎng)的鐵皮石斛，如下圖所示：圖1殼寡糖濃度由小到大所對(duì)應(yīng)的鐵皮石斛的生長(zhǎng)情況由以上數(shù)據(jù)可得，隨著殼寡糖少量的加入，