生化藥物的毛細(xì)管電泳分離與富集.pdf_第1頁(yè)
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1、藥物濫用給人類健康和生態(tài)平衡帶來(lái)的危害不象其它環(huán)境污染那樣直觀,它的隱形性使得人們一度無(wú)視它對(duì)健康的嚴(yán)重威脅以及對(duì)環(huán)境的潛在污染。因此,建立簡(jiǎn)單快速有效的分析方法對(duì)藥物進(jìn)行監(jiān)控是十分必要的。基于環(huán)境樣品的復(fù)雜性考慮,本文選用毛細(xì)管電泳這一高效快速的分離技術(shù)進(jìn)行生化藥物的分析。本論文的研究工作包括兩方面。一方面為抗生素類藥物的毛細(xì)管電泳分離分析,另一方面為生物大分子的毛細(xì)管電泳在線富集方法的探究。 為此,本文在簡(jiǎn)介毛細(xì)管電泳原理的

2、基礎(chǔ)上,論述了分離模式,檢測(cè)方法,在線富集技術(shù)及其在生化藥物分析中的研究進(jìn)展。并討論了貫穿于本文每個(gè)研究章節(jié)的重要物質(zhì)——表面活性劑在毛細(xì)管電泳中的應(yīng)用。內(nèi)容如下: (1)抗生素類藥物的毛細(xì)管膠束電動(dòng)色譜的分離分析。由抗生素濫用帶來(lái)的環(huán)境問(wèn)題已不容忽視。因此,建立行之有效的抗生素的分析檢測(cè)方法迫在眉睫。采用毛細(xì)管膠束電動(dòng)色譜分離模式,通過(guò)優(yōu)化分離條件,可同時(shí)實(shí)現(xiàn)對(duì)阿莫西林,氯唑西林,頭孢氨芐,頭孢噻肟,頭孢唑林五種抗生素的檢測(cè)。

3、僅需9分鐘的分析時(shí)間,線性范圍0.1-250mg/ml,相關(guān)系數(shù)為0.9976-0.9994,檢測(cè)限為0.01-0.13mg/ml。該分析方法簡(jiǎn)單快速,行之有效。將該方法應(yīng)用于合成尿樣中抗生素的分析,日間和日內(nèi)的RSDs分別為1.31-6.07%和0.66-7.65%,回收率為90%-110%。該方法同樣應(yīng)用于商品化藥物的分析檢測(cè),日間和日內(nèi)的RSDs分別為3.95-8.12%和1.51-2.86%,遷移時(shí)間的日間和日內(nèi)的RSDs分別為

4、0.47-1.11%和0.032-0.295%。此外,本文還對(duì)分離條件對(duì)抗生素的遷移行為的影響做了理論探討。 (2)生物大分子的毛細(xì)管電泳在線富集方法的探討。將幾種常見(jiàn)的毛細(xì)管電泳在線堆積技術(shù),簡(jiǎn)單場(chǎng)放大樣品堆積,增強(qiáng)場(chǎng)放大樣品堆積,整管進(jìn)樣,以及在此技術(shù)之上發(fā)展起來(lái)的掃拂富集技術(shù)應(yīng)用于胰島素的分析中,可以獲得胰島素檢測(cè)信號(hào)的增強(qiáng),在不同的優(yōu)化條件下,它們的富集效率可達(dá)到1.5-101倍。但是,由于胰島素分子的性質(zhì)決定,相對(duì)于其

5、他小分子物質(zhì)的富集效果而言,不能獲得很高的富集效率。如何增大胰島素分子的表面電荷,以及如何使胰島素分子結(jié)構(gòu)更為緊湊利于聚集,便成為提高其富集效率的關(guān)鍵因素。新提出的掃拂富集技術(shù)操作簡(jiǎn)單,并可獲得與整管進(jìn)樣接近的富集效率,有望成為一種具有發(fā)展?jié)摿Φ脑诰€樣品富集技術(shù)。 鑒于目前DNA在線富集技術(shù)的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用相對(duì)較少,建立在線富集技術(shù)對(duì)DNA進(jìn)行分析又是十分必需的。本文在大體積進(jìn)樣的基礎(chǔ)之上,利用陽(yáng)離子表面活性劑對(duì)DNA分子的聚集作用

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