以多巴胺為功能單體的溶菌酶分子印跡整體柱的制備及其應用研究.pdf

1、分子印跡整體柱技術融合了分子印跡技術的高選擇性和整體柱的高效分離能力的優(yōu)勢，是近年來快速發(fā)展的一種新穎的分離技術。但是將這種技術應用于蛋白質的富集和分離尚在起步階段。
　　 本論文將蛋白質分子印跡技術與有機整體柱結合在一起，研究了以多巴胺(dopamine)為功能單體的溶菌酶(Lyz)蛋白質分子印跡整體柱的制備，本論文的工作主要分為以下三個部分：
　　 第一部分，概述了蛋白質印跡技術，整體柱技術，以及分子印跡整體柱技術的

2、基本理論及發(fā)展應用。
　　 第二部分，合成甲基丙烯酸縮水甘油酯(GMA)-二乙烯苯(DVB)的有機整體柱骨架，并對其制孔劑選擇、單體和交聯劑比例及合成條件進行了優(yōu)化。經電鏡掃描、流速-背壓關系及壓汞考察，該整體柱骨架具有良好的孔徑結構。以該骨架為基質，利用甲基丙烯酸縮水甘油酯富含的環(huán)氧基團采用Schiff法固載模板蛋白溶菌酶，以多巴胺為功能單體，二次聚合于基質表面，制備共價型溶菌酶蛋白質分子印跡整體柱，并對其識別性能進行了探索。

3、
　　 第三部分，以甲基丙烯酸縮水甘油酯-二乙烯苯的有機整體柱骨架為基質，多巴胺為功能單體，采用表面非共價鍵印跡法制備了多巴胺包覆的溶菌酶印跡整體柱。利用多巴胺含有的苯環(huán)與有機整體柱骨架上的苯環(huán)的π-π電子配對作用，將模板蛋白溶菌酶包覆在整體柱基質表面，形成的2D印跡孔穴在最優(yōu)高效液相色譜條件下，對目標蛋白溶菌酶具有良好的識別作用，印跡因子達到了5.04。并利用該印跡整體柱進行了實際樣雞蛋清中溶菌酶的分離分析，取得了滿意的結果。