二十二碳六烯酸對肝癌細胞生長抑制及誘導凋亡的作用及機制.pdf

1、摘要目的：探討不同濃度的二十二碳六烯酸對人肝癌HepG2及SMCC一1171細胞的作用及其機制，為其應用于肝癌的藥物預防和治療提供實驗及理論依據(jù)。方法：體外培養(yǎng)人肝癌細胞HepG2及SMCC一1171，以DHA濃度Oug／mL為陰性對照，設置濃度為15、30、45、60、75ug／mL的實驗組。采用CCK一8和流式細胞術檢測不同濃度DHA對HepG2及SMCC1171細胞生長的相對抑制率及凋亡情況，并運用熒光定量PCR及蛋白質印跡法分別

2、從基因和蛋白質水平分析不同濃度DHA作用前后肝癌細胞Bcatenin及cmyc表達量的變化。結果：CCK8實驗表明DHA在體外能抑制HepG2及SMCC一1171細胞生長，在DHA作用濃度為O45ug／mL，作用時間24h時，實驗組與對照組細胞吸光度A值差異有顯著的統(tǒng)計學意義(P001)，實驗組內兩兩比較差異有統(tǒng)計學意義(PO01)。繼續(xù)增加藥物濃度或作用時間，差異無統(tǒng)計學意義。流式細胞術發(fā)現(xiàn)DHA可促進HepG2及SMCC一1171細

3、胞凋亡，實驗組與對照組細胞凋亡率差異有顯著的統(tǒng)計學意義(P001)，實驗組內兩兩比較差異有統(tǒng)計學意義(PO01)。熒光定量PCR顯示DHA可下調HepG2及SMCC—l171細胞中cmyc基因表達水平，實驗組與對照組c—myc基因相對表達量的差異有顯著的統(tǒng)計學意義(P001)，實驗組內兩兩比較差異有統(tǒng)計學意義(PO01)；實驗組與對照組及各實驗者組之間B—catenin基因的相對表達量差異無統(tǒng)計學意義。蛋白質印跡法顯示DHA可降低Hep

4、G2及SMCC—l171細胞Bcatenin、c—myc蛋白質的表達量(P005)。結論：DHA對人肝癌HepG2及SMCC一1171細胞有明顯的生長增殖抑制及促進凋亡的作用，與其降低B—catenin蛋白質水平進而下調Cmyc基因表達水平有關。碩士研究生：李衍彥(肝膽外科)指導老師：曹景玉主任醫(yī)師關鍵詞：二十二碳六烯酸；肝癌；wnt／Bcatenin信號通路andthecontrolgroupandtheexperimentalgro

5、upWesternblotdemonstratedthatDHAcoulddecreasetheproteinsexpressionofI]cateninandcmycinHepG2andSMCC1171cells(PO05)Conclusion：DHACanpromotapoptosisandinhibitproliferationonHepG2andSMCC1171cells，Thepossiblemechanismisrelate