水稻Bi-1基因的克隆與功能分析.pdf

1、水稻是世界上最主要的糧食作物之一。非生物逆境如高溫、低溫、干旱、高鹽等是影響水稻生長和產量的主要環(huán)境因素。近年來，隨著全球環(huán)境的日益惡化，各種極端氣候嚴重的威脅著人類糧食生產安全，使得培育耐逆水稻成為當今重點研究領域之一。目前，利用分子生物學技術發(fā)掘水稻抗逆相關基因以及研究水稻的逆境信號傳導，可以為培育抗逆水稻品種提供重要信息，因此具有重要的意義。本論文研究的主要結果如下:
　　1.本實驗室通過酵母雙雜交技術，在水稻逆境cDNA文

2、庫中篩選出一個類似BaxInhibitor-I基因OsBI-1，并以此為基礎，利用農桿菌介導的水稻愈傷組織轉化法獲得轉正義與反義OsBI-1轉基因的水稻，為后續(xù)研究生物和非生物脅迫中OsBI-1基因的表達變化和脅迫下作用機制提供材料。
　　2.運用在線數據庫分析OsBI-1，發(fā)現該基因開放閱讀框(ORF)795bp，編碼264個氨基酸殘基，預測分子量約28.76KD，等電點7.14。對其蛋白的功能預測發(fā)現序列在21-261氨基酸處

3、存在體抗凋亡蛋白GAAP一個細胞凋亡的調節(jié)器。啟動子分析發(fā)現該基因含7個逆境誘導相關的順式作用元件，推測該基因可能和多種逆境誘導相關。
　　3.通過半定量RT-PCR分析OsBI-1，發(fā)現其在水稻不同生理時期不同組織中都有表達。同時，在低溫、高溫、高鹽、干旱和脫落酸等不同逆境脅迫下，其表達都有不同程度上升，說明OsBI-1可能屬于多逆境誘導基因。
　　4.構建了OsBI-1的綠色熒光蛋白載體，PEG介導瞬時轉化到水稻的原生質