小鼠精子發(fā)生過程中dysbindin-1的表達.pdf

1、目的：
　　Dysbindin-1是溶酶體相關細胞器生物發(fā)生復合體-1（ Biogenesis of Lysosome-related Organelles Complex-1,BLOC-1）的一個亞基，在多種溶酶體相關細胞器（lysosome-related organelles, LROs）的發(fā)生中發(fā)揮重要功能。LROs是一類有著和溶酶體相似特性的細胞器，如黑色素細胞的黑素顆粒、血小板的致密顆粒等，均來源于高爾基復合體，pH值

2、呈酸性。此外，LROs還有一些細胞特異性組分，而且形態(tài)功能也因細胞不同而異。BLOC-1是由八個亞基組成的復合體，參與細胞內的囊泡形成和運輸過程。精子頭部的頂體被認為是一種LRO，在受精時發(fā)揮重要作用。迄今關于dysbindin-1在睪丸中的報道極少，其作用不明確。最近研究表明RNF151與dysbindin-1有直接相互作用。RNF151蛋白特異地表達在長形精子細胞中，鑒于dysbindin-1在囊泡運輸中起重要作用，故推測該蛋白在頂

3、體形成中發(fā)揮作用，但dysbindin-1是否參與頂體的形成并無實驗證據。本研究探討精子發(fā)生過程中dysbindin-1的表達及dysbindin-1對精子及頂體形態(tài)的影響，為進一步研究dysbindin-1在精子發(fā)生中的作用提供必要的形態(tài)基礎。
　　方法：
　　取生后6-21 d、28 d、35 d、42 d和3月齡的雄性小鼠各3只，HE染色觀察不同天數睪丸組織的形態(tài)結構，用western blot檢測睪丸組織dysbin

4、din-1的表達；以dysbindin-1缺失突變的sdy小鼠為研究對象，收集附睪尾部精子，一部分用western blot檢測精子中是否有dysbindin-1的表達，另一部分制備精子涂片，HE染色顯示精子形態(tài)，用異硫氰酸熒光素-豌豆凝集素（FITC-PSA）和抗精子蛋白56（sp56）單克隆抗體進行熒光染色顯示頂體的結構。
　　結果：
　　1.不同品系成年小鼠的睪丸、附睪組織中只有dysbindin-1A，無-1C的表達

5、。
　　2.Dysbindin-1A在生后不同發(fā)育階段小鼠睪丸組織中均有表達。在生后7 d時的睪丸組織已有dysbindin-1A的表達，在14 d、21 d和28 d有增多的趨勢，到35 d和42 d時，又略有下降，但變化無明顯的統計學意義（P>0.05）。dysbindin-1A主要表達在睪丸組織細胞的胞漿中。
　　3.Dysbindin-1缺失突變的sdy小鼠的精子及頂體的形態(tài)與野生型相比未見明顯異常。
　　結論