微接觸印刷法制備膠原蛋白濃度梯度及其對內皮細胞粘附與遷移的研究.pdf

1、為將不同濃度蛋白經單一步驟轉印至同一個基材表面，我們嘗試在傳統微接觸印刷技術上進行改進。本文采用利用微接觸印刷技術在同一模板上印刷四種濃度膠原(50、100、200、300μg/ml)，實現了在同一基材表面制備含有不同蛋白濃度的模板材料。掃描電子顯微鏡分析表明：PDMS印章表面平整，圖形完整。激光共聚焦顯微鏡觀察不同濃度FITC-膠原蛋白(50、100、200、300μg/ml)在基材表面吸附情況。采用熒光分析軟件分析了基材表面蛋白域熒

2、光強度與蛋白濃度的相關性。白蛋白用來封閉蛋白未粘附域，封閉后模板材料表面接種人臍靜脈內皮細胞，探討不同濃度膠原蛋白構建的生物材料對內皮細胞粘附與遷移的影響。以MTT法考察不用濃度膠原對人臍帶內皮細胞在6、24、48、72 h內的增殖能力影響。激光共聚焦顯微鏡檢測初始粘附期細胞骨架鋪展狀況；單個細胞軌跡測量法測量內皮細胞培養(yǎng)24 h后的遷移速率和凈位移。實驗結果表明：模板材料表面蛋白域完整，蛋白域內熒光強度均勻，50、100、200、30

3、0μg/ml4種濃度FITC-膠原蛋白在基材表面吸附的熒光強度逐步增加，分別：38.51±1.63、55.21±3.88、73.17±3.59、80.59±1.12。不同濃度蛋白域內皮細胞骨架鋪展比空白組鋪展充分。各濃度組內皮細胞增殖能力和凈位移均強于空白組(P＜0.05)，隨著濃度的增加(50μg/ml至300μg/ml)，內皮細胞增殖能力和凈位移增強(P＜0.05)。除300μg/m濃度組外各濃度組遷移速率均小于對照組(P＜0.05