重要植物病原細(xì)菌的高通量分子檢測技術(shù)研究及應(yīng)用.pdf

1、在植物的發(fā)病早期快速、準(zhǔn)確鑒定出病原菌，以防止其傳播和流行、減少經(jīng)濟(jì)損失具有重要的意義。發(fā)展快速、靈敏、高通量的分子檢測技術(shù)對提升我國植物病害控制水平，尤其是阻止外來農(nóng)林危險生物入侵、保護(hù)我國農(nóng)林經(jīng)濟(jì)安全生產(chǎn)與生態(tài)安全有著重要意義。目前基于PCR技術(shù)的分子檢測方法無法滿足對大批量樣本檢測的需要，因此尋找其他的分子檢測靶標(biāo)，發(fā)展植物病原菌高通量檢測方法，對完善病原細(xì)菌分子檢測技術(shù)、提升我國植物檢疫的技術(shù)水平和提升我國植物病害控制水平具有重

2、要意義。
　　 高通量是目前植物病原菌分子檢測的發(fā)展方向，而基于PCR擴(kuò)增的普通分子檢測方法無法一次檢測多種病原菌。因此，發(fā)展高通量檢測方法對于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和口岸檢疫具有重要意義。分子探針和DNA陣列技術(shù)等技術(shù)的出現(xiàn)為發(fā)展植物病原菌高通量檢測提供了新的思路和方法。Padlock探針是一種長的寡核苷酸探針，其兩端的序列可通過與靶標(biāo)DNA序列互補(bǔ)配對而使探針結(jié)合成環(huán)狀。Padlock探針不僅具有非常高的特異性，同時還可與DNA陣列技術(shù)結(jié)

3、合進(jìn)行高通量檢測。本研究設(shè)計了6種重要植物病原菌（Erwinia amylovora，Erwinia pyrifloiae，Pantoea stewartii subsp.stewartii，Acidovorax avenae subsp.citrulli，Xanthomonas oryzae pv.oryzae，Xanthomonas oryzaepv.oryzicola）的padlock探針，并對這些探針的特異性和靈敏度進(jìn)行了驗(yàn)證。