胰高糖素樣肽-1受體激動(dòng)劑對(duì)糖尿病大鼠胰島α細(xì)胞形態(tài)和功能的影響.pdf

1、目的：
　　胰高糖素樣肽-1(GLP-1)受體激動(dòng)劑 Exendin-4（EX-4）對(duì)2型糖尿病大鼠胰島α細(xì)胞形態(tài)和功能的影響目前尚不十分清楚。本研究通過(guò)不同濃度的 GLP-1受體激動(dòng)劑EX-4對(duì)2型糖尿病大鼠模型進(jìn)行干預(yù)，觀察EX-4對(duì)2型糖尿病大鼠胰島α細(xì)胞形態(tài)與功能的影響，從而為探討2型糖尿病的病理生理學(xué)和臨床應(yīng)用提供新的理論依據(jù)。
　　方法：
　　采用高糖高脂喂養(yǎng)并聯(lián)合1％的STZ（35mg/kg）腹腔注射建立

2、T2DM大鼠模型。40只雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照（NC組，N=10）組和糖尿病組（n=30）。剔除造模失敗死亡的大鼠后將剩余25只納入本實(shí)驗(yàn)。分為糖尿病對(duì)照組（DC組,n=8）， Exendin-4治療組(EX組,n=17)，其中EX低劑量組（EXL組n=8）, EX高劑量組（EXH組，n=9）。將Exendin-4溶于PBS溶液，EXL組左下腹腔注射5μg/kg，EXH組20μg/kg，每日定時(shí)兩次（上午9：00和下午5：

3、00），NC、DC組注射PBS，治療8周。干預(yù)8周后，空腹12h,次日上午于給藥0h,1h,2h,3h,后分別頸靜脈抽血測(cè)血糖，取血清標(biāo)本用放射免疫法測(cè)定血清胰高糖素。剝離胰腺組織，置于中性福爾馬林液固定，然后石蠟包埋做切片備用。石蠟切片做 HE染色以觀察形態(tài)學(xué)變化，免疫組化法染色觀察胰高糖素表達(dá)水平，觀察α細(xì)胞形態(tài)及數(shù)量變化。
　　結(jié)果：
　　1.各組大鼠及血清胰高糖素水平
　　干預(yù)前，DC組、EXL組及EXH組胰高

4、糖素均較NC組明顯升高（P<0.01）。干預(yù)8周后，EXL組及EXH胰高糖素水平較干預(yù)前下降（P<0.05），EXH組下降較EXL組顯著（P<0.05），且低于與同期DC組（P<0.01）。
　　2.干預(yù)后于末次給藥（0h,1h,2h,3h）監(jiān)測(cè)血糖，繪制血糖曲線圖
　　DM組、EXH組、EXL組大鼠血糖明顯高于DC組，EXH組、EXL組血糖較DM組明顯下降（P<0.01），EXH組下降幅度較EXL組大，且血糖隨時(shí)間點(diǎn)增加而

5、下降。
　　3.各組大鼠胰島α細(xì)胞免疫組化染色結(jié)果
　　免疫組化法定位胰高糖素，Glucagon蛋白表達(dá)在細(xì)胞胞漿中，NC組Glucagon蛋白主要分布于胰島外周的α細(xì)胞，且量較少，DC組和EX組Glucagon蛋白除分布在胰島外周α細(xì)胞外，在胰島中央也多見(jiàn)表達(dá)。干預(yù)8周后，與NC組相比，DC組和EX組胰高糖素蛋白表達(dá)明顯增多，其中 EX組表達(dá)量少于 DC組。EXH組表達(dá)量少于 EXL組。
　　4.各組大鼠胰腺組織HE

6、染色結(jié)果
　　NC組胰島豐富形態(tài)飽滿，細(xì)胞核居中分布在均勻的胞漿中。內(nèi)分泌部胰島和外分泌部腺小葉清晰可見(jiàn)。在DC組及實(shí)驗(yàn)組中，胰島排列相對(duì)緊密，胰島間多見(jiàn)管腔內(nèi)存有紅細(xì)胞的毛細(xì)血管分布。胰島出現(xiàn)不同程度結(jié)構(gòu)破壞以及脂肪的浸潤(rùn)和慢性炎癥的改變。在DC組，上述改變最為顯著。與DC組相比，EXL組EXH組上述改變有明顯改善，且EXH組改善情況優(yōu)于EXL組。
　　結(jié)論：
　　GLP-1受體激動(dòng)劑Exendin-4能夠改善2型糖