miR-18a通過(guò)調(diào)控SEMA5A影響胃癌細(xì)胞的增殖與遷移.pdf

1、MiRNA是內(nèi)源的非編碼小RNA，長(zhǎng)約22-23bp，可以結(jié)合到基因的3‘UTR區(qū)域，形成沉默復(fù)合物，抑制mRNA的翻譯或者降解mRNA。近些年，眾多研究都揭示了miRNA在細(xì)胞增殖、凋亡、器官發(fā)育、腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移等眾多生命活動(dòng)中起著重要作用。MiRNA-17-92是高度保守的多順?lè)醋觤iRNA基因簇，編碼6種miRNA，調(diào)控多種靶基因的表達(dá)，而這些靶基因在生物的發(fā)育過(guò)程起著關(guān)鍵作用，對(duì)它的深入研究有著重要意義。SEMA5A可以與它的

2、受體PLXNB3結(jié)合，參與調(diào)控軸突的導(dǎo)向，并與多種細(xì)胞的增殖、凋亡、細(xì)胞遷移等生理功能相關(guān)。
　　本研究根據(jù)生物信息學(xué)預(yù)測(cè)SEMA5A是miRNA-17-92的潛在靶基因，并通過(guò)雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)分析證明與miRNA-17-92家族成員miR-18a的相互作用。運(yùn)用實(shí)時(shí)定量熒光PCR和Western Blot證明在胃癌細(xì)胞MKN45中過(guò)表達(dá)miR18a會(huì)導(dǎo)致SEMA5A的mRNA和蛋白水平表達(dá)的下調(diào)。細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)