靈芝中三萜類化合物的提取及其抗氧化活性研究.pdf

1、近年來(lái),隨著靈芝人工養(yǎng)殖面積的逐步擴(kuò)大，人們?cè)絹?lái)越關(guān)注于靈芝相關(guān)產(chǎn)品的開發(fā)和研究。但目前，靈芝中功能成分的研究不夠完善，一些有效活性成分沒有得到充分利用，易造成靈芝資源的浪費(fèi)。因此，本文以山東冠縣人工培育的南韓靈芝作為原料，探究其中的活性成分----靈芝三萜類化合物，通過(guò)實(shí)驗(yàn)提高其得率，并對(duì)靈芝三萜進(jìn)行了初步分離純化和鑒定，研究了其抗氧化活性。本文主要通過(guò)對(duì)比不同提取方法，利用響應(yīng)面優(yōu)化設(shè)計(jì)，得出靈芝三萜的最優(yōu)提取工藝條件。利用大孔樹脂

2、，對(duì)粗提取液進(jìn)行分離純化，通過(guò)篩選大孔樹脂、靜態(tài)及動(dòng)態(tài)吸附動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)，摸索分離純化靈芝三萜的洗脫條件。另外，對(duì)靈芝三萜類化合物進(jìn)行了進(jìn)一步分析，改進(jìn)了高效液相色譜條件，并串聯(lián)質(zhì)譜法對(duì)靈芝三萜類物質(zhì)進(jìn)行了鑒定。最后，對(duì)比不同提取方法所得靈芝三萜提取液，進(jìn)行抗氧化活性研究。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴采用超高壓輔助的方法提取靈芝中的三萜類物質(zhì)，并與傳統(tǒng)浸提方法、超聲輔助提取方法進(jìn)行了比較，通過(guò)對(duì)工藝條件進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化設(shè)計(jì)，發(fā)現(xiàn)超高壓輔

3、助提取所得靈芝三萜得率最高，提取時(shí)間最短。最佳工藝條件為：料液比1:26g/mL，乙醇濃度96％，設(shè)定壓力為295 MPa，溫度為40℃，時(shí)間為5min，預(yù)測(cè)靈芝三萜最大得率為1.3200%。⑵利用大孔樹脂將超高壓輔助提取得到的靈芝三萜粗提液進(jìn)行分離純化，在篩選大孔樹脂、靜態(tài)和動(dòng)態(tài)吸附動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，得出最優(yōu)條件為：大孔樹脂型號(hào)為AB-8，上樣量30mL,保持流速為2 BV/h，pH為4，按蒸餾水、乙醇濃度依次為15%、35%、95

4、%的順序進(jìn)行洗脫。⑶考察高效液相色譜技術(shù)分離靈芝三萜的色譜條件，最終選擇流動(dòng)相為乙腈-水。通過(guò)液相色譜-質(zhì)譜法綜合分析靈芝中的三萜類成分，初步推測(cè)提取液中含靈芝酸類三萜成分。⑷考察靈芝中三萜類成分的體外抗氧化實(shí)驗(yàn)，以DPPH自由基、羥自由基、超氧陰離子自由基的清除率和鐵離子還原力為依據(jù),對(duì)照Vc和BHT，判定抗氧化能力。超高壓輔助方法提取所得靈芝三萜體外抗氧化能力優(yōu)于其他兩種方法，高濃度的靈芝三萜體外抗氧化能力高于低濃度，展現(xiàn)出一定強(qiáng)度