肝癌術后肝外轉移相關DNA拷貝數變異分子標志初探.pdf

1、目的：
　　肝細胞癌（hepatocellular carcinoma, HCC）是國內常見的惡性腫瘤，手術仍是目前HCC的主要根治性治療方法，而術后肝外轉移是患者預后差的一個重要因素。但目前對于具有何種分子特征的HCC易發(fā)生肝外轉移仍知之甚少，因此篩選HCC術后肝外轉移相關分子標志具有重要意義。既往研究顯示DNA拷貝數變異（copy number aberrations, CNAs）與多種腫瘤進展和預后有關，且與HCC術后肝內復

2、發(fā)相關，但CNAs與HCC術后遠處轉移的關系仍不清楚。本研究旨在探討HCC術后肝外轉移相關的CNAs分子標志。
　　方法：
　　以66例HCC術后患者為研究對象，隨訪首次出現肝外轉移的時間，無肝外轉移生存時間定義為手術至出現肝外轉移或末次隨訪之時間間隔。采用高分辨率Agilent244K微陣列比較基因組雜交（array-based comparative genomic hybridization, aCGH）技術檢測HCC

3、組織基因組DNA的CNAs。采用Agilent G2565BA DNA微陣列掃描儀對雜交芯片進行掃描，運用Feature Extraction v9.5進行數據提取與分析。全基因組CNAs與HCC術后遠處轉移的相關性分析采用Cox風險比例模型和Log-rank檢驗，以Kaplan-Meier繪制生存曲線。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。統(tǒng)計學分析采用Stata13.0統(tǒng)計學軟件包(Stata Corporation, College S

4、tation, TX)。
　　結果：
　　1.全組66例HCC樣本的術后隨訪時間為1.6～90.5個月，中位隨訪時間39.9個月，總隨訪時間2633.4人月，隨訪期間共有25例（37.9%）患者出現肝外轉移。
　　2.單因素Cox分析顯示，5個臨床病理學因素與HCC術后肝外轉移顯著相關（均P<0.05），其中高血壓史、無完整腫瘤包膜、高TNM分期（Ⅲ期）為危險因素，而低血小板計數（<100×109/L）和凝血酶原時間延

5、長（>12秒）為保護因素。
　　3.全基因組CNAs與HCC術后遠處轉移的單因素Cox分析顯示，5個CNAs片段是肝外轉移的顯著相關因素（均P<0.05），其中6p21.32增益、15q11.2增益和20q12-13.13增益是HCC術后肝外轉移的危險因素；4q12丟失和4q28.1-35.2丟失是轉移保護因素。
　　4. HCC術后肝外轉移相關因素的多元逐步 Cox回歸分析結果顯示，6p21.32增益、4q28.1-4q3

6、5.2缺失、高TNM分期（Ⅲ期）和高血壓史是HCC術后遠處轉移的獨立預后因素（均P<0.05），其中6p21.32增益、高TNM分期和高血壓史是轉移危險因素，而4q28.1-4q35.2缺失是轉移保護因素。
　　5. CNAs組合與HCC術后肝外轉移的相關性：依據6p21.32增益與4q28.1-35.2丟失狀態(tài)優(yōu)化組合，發(fā)現6p21.32增益、6p21.32無增益/4q28.1-35.2丟失和6p21.32無增益/4q28.1-

7、35.2無丟失3組 HCC的術后無肝外轉移生存差異有統(tǒng)計學意義（Log-rank檢驗, P<0.01）；相比6p21.32無增益/4q28.1-35.2無丟失組，6p21.32無增益/4q28.1-35.2丟失組的肝外轉移風險顯著降低至0.18倍（95%CI=0.06~0.57, P<0.01），而6p21.32增益組的肝外轉移風險顯著增加至2.91倍（95% CI=1.13~7.46, P<0.05）。
　　結論：
　　1

8、．6p21.32增益、15q11.2增益和20q12-13.13增益是HCC術后肝外轉移的危險因素，而4q12丟失和4q28.1-35.2丟失是轉移保護因素。
　　2．6p21.32增益和4q28.1-35.2丟失是HCC術后肝外轉移的獨立預后因素，前者是轉移危險因素，后者是轉移保護因素。
　　3.基于6p21.32增益和4q28.1-35.2丟失2個獨立預后因素的CNAs優(yōu)化組合可在手術早期對HCC術后肝外轉移風險作出預判