高效廣譜蘇云金芽孢桿菌工程菌的構(gòu)建及殺蟲(chóng)晶體蛋白的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、本論文圍繞蘇云金芽孢桿菌工程菌的構(gòu)建、殺蟲(chóng)晶體蛋白的分子設(shè)計(jì)、殺蟲(chóng)晶體蛋白的體外結(jié)晶等方面進(jìn)行了一系列的研究，主要內(nèi)容包括：將對(duì)鞘翅目害蟲(chóng)高毒力的cry3Aa7基因分別通過(guò)電擊轉(zhuǎn)化到對(duì)鱗翅目害蟲(chóng)高毒力的野生菌株G03和UV17中，得到工程菌G033A和UV173A。室內(nèi)生測(cè)結(jié)果表明兩株工程菌對(duì)鞘翅目害蟲(chóng)和鱗翅目害蟲(chóng)都表現(xiàn)出很高的毒力。通過(guò)監(jiān)測(cè)工程菌在田間的殘留、擴(kuò)散以及對(duì)非靶標(biāo)昆蟲(chóng)的影響，完成了工程菌中間試驗(yàn)和環(huán)境釋放階段的安全性評(píng)價(jià)。

2、評(píng)價(jià)結(jié)果表明工程菌G033A和UV173A在田間存活時(shí)間較短，擴(kuò)散范圍較小，對(duì)草蛉、瓢蟲(chóng)等非靶標(biāo)昆蟲(chóng)種群無(wú)不良影響。因此認(rèn)為這兩種工程菌使用安全，對(duì)于生態(tài)環(huán)境不會(huì)造成有害影響。通過(guò)重疊引物PCR得到由Cry1Ca蛋白DomainⅠ分別與Cry1Aa、Cry1Ab、Cry1AcDomainⅢ組合的嵌合基因cry1C1C1Aa、cry1C1C1Ab、cry1C1C1Ac，在大腸桿菌BL21中進(jìn)行表達(dá)；提取三種蛋白，對(duì)棉鈴蟲(chóng)和甜菜夜蛾進(jìn)行了殺

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