發(fā)育相關(guān)基因在新生死亡體細(xì)胞克隆牛中的表達(dá).pdf

1、為了研究造成克隆動(dòng)物器官發(fā)育異常以及出生死亡的可能分子機(jī)理,我們用熒光定量RT-PCR技術(shù)研究了22個(gè)在胚胎發(fā)育和器官形成過程中有重要作用的基因在出生死亡的克隆牛心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟和大腦等6個(gè)組織中的表達(dá),其中包括4個(gè)對(duì)染色質(zhì)進(jìn)行修飾的基因(DNMT、PCAF、MeCP2、EED)、類胰島素生長(zhǎng)因子系統(tǒng)的8個(gè)基因(IGF1、IGF2、IGFIR、IGF2R、IGFBP1、IGFBP2、IBGBP3和IGFBP4)、成纖維生長(zhǎng)因

2、子(FGF2和FGF10)和成纖維生長(zhǎng)因子受體(FGFR1和FGFR2)以及另外6個(gè)對(duì)發(fā)育有重要作用的基因(EGFR、PDGFRa、VEGF、BMP4、Hsp70.1和Xist).結(jié)果表明:在22個(gè)被研究的基因中,有16個(gè)在體細(xì)胞克隆牛的組織中表達(dá)發(fā)生異常.其中IGFBP4在體細(xì)胞克隆牛的5個(gè)組織中表達(dá)發(fā)生異常;IGF2R和BMP4在體細(xì)胞克隆牛的4個(gè)組織中表達(dá)發(fā)生異常;DNMT、PCAF、IGF2、VEGF和Hsp70.1等5個(gè)基因在

3、體細(xì)胞克隆牛的3個(gè)組織中表達(dá)發(fā)生異常:FGF10、FGFR1和PDGFRa等3個(gè)基因在體細(xì)胞克隆牛的3個(gè)組織中表達(dá)發(fā)生異常;IGFIR、IGFBP2、IGFBP3、EGFR和Xist等5個(gè)基因各在體細(xì)胞克隆牛的1個(gè)組織中表達(dá)發(fā)生異常.EED、MECP2、IGF1、IGFIR、FGF2和FGFR2等6個(gè)基因在體細(xì)胞克隆牛的組織中未發(fā)現(xiàn)表達(dá)異常.從基因異常表達(dá)的器官角度分析,心臟是6個(gè)被研究器官中發(fā)現(xiàn)基因異常表達(dá)最多的器官,有10個(gè)基因在體

4、細(xì)胞克隆牛的心臟中表達(dá)發(fā)生異常,其中9個(gè)表現(xiàn)為顯著升高.體細(xì)胞克隆牛的肝臟中有7個(gè)基因表達(dá)發(fā)生異常,其中5個(gè)表現(xiàn)為顯著升高.體細(xì)胞克隆牛的肺臟、腎臟和大腦中均有6個(gè)基因表達(dá)發(fā)生異常,其中腎臟中異常表達(dá)的6個(gè)基因均表現(xiàn)為顯著降低,也是6個(gè)被研究器官中唯一的一個(gè)基因異常表達(dá)的趨勢(shì)表現(xiàn)為一致的器官.脾臟是6個(gè)被研究器官中發(fā)現(xiàn)基因異常表達(dá)最少的器官,有4個(gè)基因在體細(xì)胞克隆牛的脾臟中表達(dá)發(fā)生.比較來自兩種不同供體細(xì)胞的克隆牛之間的表達(dá)差異,發(fā)現(xiàn)有