CODIS系統(tǒng)三個miniSTR熒光標記復合擴增的構建及法醫(yī)學應用.pdf

1、目的:對TH01、TPOX、CSF1PO三個基因座PCR-miniSTR和普通引物PCR-STR的結果進行一致性檢驗；構建TH01、TPOX、CSF1PO三個基因座miniSTR熒光標記復合擴增體系：對該熒光標記復合擴增體系進行法醫(yī)學應用性研究。 方法:參照Bulter等對TH01、TPOX、CSF1PO三個基因座miniSTR的引物設計，選用本教研室提供的123例無血緣關系個體的血樣，進行TH01、TPOX、CSF1PO三個基因

2、座PCR-miniSTR銀染檢測，檢測結果與商品化試劑盒的檢測結果進行一致性檢驗；采用國產(chǎn)DNA聚合酶構建miniSTR熒光標記復合擴增體系，用美國ABI-310基因分析儀進行檢測；對該熒光標記復合擴增體系的靈敏度、準確性、種屬特異性、不同退火溫度下復合擴增的效果、陳舊血痕DNA的檢測等進行研究。 結果:123例無血緣關系個體的TH01、TPox、CSF1PO三個基因座PCR-miniSTR銀染檢測結果與商品化試劑盒檢測結果一致；

3、成功建立了TH01、TPOX、CSF1PO三個基因座miniSTR熒光標記復合擴增體系，該體系的的退火溫度范圍較寬，以60℃為最佳，檢測靈敏度為0.25ng模板DNA，擴增準確性高，具有較高的種屬特異性，可以應用于陳舊血痕DNA檢測。 結論:TH01、TPOX、CSF1PO三個基因座PCR-miniSTR結果可以與該三個基因座普通引物PCR-STR的結果進行比對，具有數(shù)據(jù)庫兼容性；該熒光標記復合擴增體系可應用于ABI-310檢測平