肥胖大鼠袖狀胃切除術后腸源性脂多糖的變化及其相關性研究.pdf

1、目的：
　　減重手術是治療肥胖及其相關代謝綜合征的有效方法之一，但目前手術減重的作用機制仍未完全明確。近來的研究表明，腸源性脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)作為革蘭陰性菌細胞壁的組成部分，在參與脂肪乳糜微粒吸收、促成胰島素抵抗等方面起到重要作用。本研究通過檢測肥胖大鼠腸道菌群中革蘭陰性菌所含脂多糖在參與袖狀胃切除手術的過程中的代謝變化及體內(nèi)分布情況探究其可能的相關作用機制。
　　方法：
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2、肥胖大鼠模型建立、分組及術式確立：6周齡雄性SD大鼠80只，手術組（n=20）、假手術組（n=20）及練習組（n=30）喂養(yǎng)高脂飼料，正常對照組（n=10）喂養(yǎng)普通飼料。喂養(yǎng)時間均為8周，每日攝食量不作限制。8周后測量大鼠體重、體長、糖耐量及胰島素抵抗水平。手術組行袖狀胃切除術，殘胃容積參照臨床常用袖狀胃切除術切除范圍，按術后處死時間分為術后1周組（n=5）、術后2周組（n=5）、術后3周組（n=5）及術后4周組（n=5）。假手術組行剖

3、腹探查術，分組同手術組。
　　（2）手術質量評價及學習曲線研究：從手術時間、術中出血量等方面評價手術質量，繪制學習曲線圖，總結術中及術后各方面的因素，歸納大鼠手術死亡原因，為建模成功提供有價值的經(jīng)驗教訓。
　?。?）大鼠體重變化曲線：手術組及假手術組術后每兩日測量大鼠體重，繪制體重變化曲線，行統(tǒng)計學處理。
　?。?）大鼠糞便革蘭染色：取手術組及假手術組中4周組大鼠其術前及術后糞便行革蘭染色，計算其革蘭陽性菌及陰性菌菌群

4、比例。
　　（5）大鼠血清LPS水平：于術前及術后每周定時抽取手術組及假手術組大鼠尾靜脈血液，通過大鼠脂多糖酶聯(lián)免疫檢測法定量檢測其血漿LPS水平，行統(tǒng)計學處理。
　?。?）大鼠肝臟及腹腔脂肪LPS分布：處死大鼠時，取手術組及假手術組肝臟組織、腸系膜脂肪、腎周脂肪、附睪脂肪等組織各100mg，以9倍生理鹽水研磨為組織勻漿，將研磨液離心后取上清，通過大鼠脂多糖酶聯(lián)免疫檢測法定量檢測其LPS水平，行統(tǒng)計學處理。
　　（7）

5、大鼠葡萄糖耐量試驗及胰島素抵抗水平：術前及術后對各組大鼠行糖耐量試驗及胰島素抵抗水平檢測，檢測結果行統(tǒng)計學處理。
　　結果：
　?。?）手術組大鼠體重超過正常對照組大鼠31.38％，假手術組大鼠體重超過正常對照組大鼠29.74%；且體長、糖耐量水平及胰島素抵抗水平高脂喂養(yǎng)大鼠與對照組存在明顯差異（p＜0.0001）。肥胖及胰島素抵抗大鼠動物模型建立成功。
　　（2）手術時間是影響大鼠術中及術后存活率的第一因素，一般應控

6、制在50分鐘以內(nèi)。在所有死亡大鼠中，因手術時間過長導致大鼠死亡達31.82%。
　?。?）術后手術組與假手術組大鼠體重均出現(xiàn)下降，但假手術組大鼠之后體重逐漸回升，且超過術前水平。手術組大鼠體重自術后開始呈進行性下降，后逐漸趨于穩(wěn)定，體重降低水平與假手術組相比，差異有統(tǒng)計學意義（p＜0.0001）。
　?。?）在隨機選取的油鏡下視野中，與假手術組相比，手術組大鼠術后革蘭陽性菌數(shù)量增多（p＜0.0001），革蘭陰性菌數(shù)量減少（p

7、＜0.0001）。
　?。?）術前手術組與假手術組大鼠血清LPS水平無明顯差異（p=0.5226）；術后兩組大鼠血清LPS均有不同程度升高；之后手術組大鼠血清LPS水平出現(xiàn)明顯下降，而假手術組大鼠血清LPS水平則開始回升超過術前水平，兩組差異有統(tǒng)計學意義（p=0.0026）。且兩組大鼠血漿LPS水平與其取血當時的體重水平具有顯著的直線相關性（p=0.0004）。
　?。?）手術組大鼠及假手術組大鼠各期肝臟組織中LPS含量無明

8、顯區(qū)別（手術組p=0.1548，假手術組p=0.7595）；手術組大鼠腎周脂肪、附睪脂肪、腸系膜脂肪組織中LPS水平隨術后時間的延長呈梯度降低趨勢；反觀假手術組大鼠腹腔脂肪組織中LPS水平與術后時間則無明顯關系，始終處于較為穩(wěn)定的水平。至術后第28天，與假手術組相比，手術組大鼠腹腔脂肪中LPS水平明顯降低（腎周脂肪p=0.0002，附睪脂肪p＜0.0001，腸系膜脂肪p=0.0101）。
　?。?）術后第28天，手術組大鼠糖耐量水

9、平及 HOMA-IR指數(shù)較術前明顯降低（p＜0.0001），而假手術組大鼠術后第28天則出現(xiàn)明顯升高（糖耐量p=0.0156、HOMA-IR p=0.0003）。兩者差異具有統(tǒng)計學意義（p＜0.0001）。
　　結論：
　　（1）肥胖大鼠袖狀胃切除術后，大鼠體內(nèi)LPS水平的變化與其體重變化有密切關系，LPS水平的變化可能是其體重改變的原因之一。
　?。?）肥胖大鼠袖狀胃切除術后，由于大鼠體內(nèi)LPS水平及體重水平的降低，