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文檔簡(jiǎn)介
1、從自然界篩選到一批幾丁質(zhì)/殼聚糖酶產(chǎn)生菌株,利用16S rRNA序列分析對(duì)其進(jìn)行初步的鑒定.結(jié)合形態(tài)特征和生理生化性質(zhì),將一株高產(chǎn)殼聚糖酶菌株C-28歸為細(xì)菌域、變形桿菌門、β-變形桿菌綱、伯克霍爾德氏菌目、伯克霍爾德氏科.研究確定C-28最佳產(chǎn)酶發(fā)酵條件為:培養(yǎng)溫度33℃、殼聚糖濃度2%、接種量2%、pH6、裝量300ml.在此培養(yǎng)條件下,48h時(shí)搖瓶中發(fā)酵液的最高酶活力可達(dá)3.81 U/ mL,是迄今所見報(bào)道中最高的發(fā)酵液酶活力水平
2、.通過硫酸銨沉淀和Sephadex G-200凝膠柱層析,純化了C-28殼聚糖酶,該酶的分子量為34.9kD,最適反應(yīng)pH值為7.0,最適反應(yīng)溫度為46℃,在45℃以下、pH 5.0-8.0的環(huán)境中比較穩(wěn)定,Mn<'2+>、Mg<'2+>、Na<'+>、K<'+>對(duì)該酶的酶活力有促進(jìn)作用,而Cu<'2+>、Co<'2+>、Fe<'3+>、Fe<'2+>對(duì)它具有抑制作用.薄層層析對(duì)酶解產(chǎn)物分析表明該殼聚糖酶對(duì)底物的作用方式是內(nèi)切型.此外,
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