缺氧對大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元P2X受體功能及表達(dá)的影響.pdf

1、缺氧是一種常見的損傷因素，海馬是中樞神經(jīng)系統(tǒng)對缺氧最敏感的部位之一。本實(shí)驗(yàn)采用急性完全缺氧模型和低壓缺氧模型，應(yīng)用膜片鉗技術(shù)和免疫組化技術(shù)對大鼠海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞的基本電生理特性、正常條件下P2X受體的藥理學(xué)特性、缺氧情況下P2X受體功能及表達(dá)的變化進(jìn)行了研究，探討P2X受體各亞型在大鼠海馬CA1區(qū)的表達(dá)及缺氧對其功能和表達(dá)影響的可能機(jī)制，結(jié)果如下： 1.顯微鏡下急性分離出的完整的神經(jīng)元表面光潔，折光性好，胞體呈錐形，細(xì)胞突起

2、完整，能迅速貼壁。 2.狀態(tài)良好的錐體細(xì)胞易于封接形成全細(xì)胞記錄并且能維持較長時間，平均靜息膜電位(RMP)為-54.96±5.24mV，在電流鉗下給予一系列由去極化至超極化的躍階電流刺激(-60-+40pA，step=10，時長200ms)，得到電壓-電流曲線，閾值37.119±4.5342mV，時程8.9571±2.1506ms動作電位幅度83.04±10.45mV(n=45)。 3.ATP有反應(yīng)的細(xì)胞占總數(shù)的95％

3、(38/40)，給予梯度濃度的ATP，結(jié)果顯示有明顯的量效關(guān)系，應(yīng)用濃度分別為0.1，1，10,100,1000μmol/L的ATP誘發(fā)的電流值為-2.019±0.508，-3.114±0.682，-9.529±3.928，-17.642±5.451，-18.4175±6.2406應(yīng)用P2X受體抑制劑suramin對ATP誘發(fā)的電流有顯著抑制作用，在應(yīng)用P2X受體調(diào)節(jié)劑IVM(100μmol/L)與低pH(pH=6.5)的條件下，不同細(xì)

4、胞有不同的反應(yīng)。 4.缺氧情況下，ATP誘發(fā)的內(nèi)向電流幅度減弱，但是此內(nèi)向電流對ATP的濃度依賴性依然存在，suramin對該電流依然有抑制作用。 5.免疫組化實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示在大鼠海馬CA1區(qū)有多種P2X受體亞型的表達(dá)，低壓缺氧可以引起P2X受體各個亞型表達(dá)的上調(diào)。 綜合以上結(jié)果：在大鼠海馬CAI區(qū)P2X受體有多亞型的廣泛表達(dá)，根據(jù)電生理學(xué)和藥理學(xué)特性，可以對P2X受體進(jìn)行亞型分析，缺氧影響下P2X受體功能的下調(diào)與