小鼠KGF毛囊特異性表達(dá)載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)基因ESC的篩選與鑒定.pdf

1、分類(lèi)號(hào)UDC學(xué)校代碼!魚(yú)量2魚(yú)密級(jí)編號(hào)學(xué)號(hào)3Q墨Q墨Q蘭5論文題目小鼠KGF毛囊特異性表達(dá)載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)基因ESC的篩選與鑒定ConstructionofaMurineHairfolliclecellSpecificExpressionVectorofKGFandScreeningandIdentificationofTransgenicEmbryonicStemCells研究生：鎏焦指導(dǎo)教師：剡盤(pán)至研究員郭坦塞副研究雖專(zhuān)業(yè)：動(dòng)物堂研究方

2、向：生殖生物堂及生物撞苤學(xué)院：生僉抖堂堂隨二零一一年六月目錄摘要1ABS7rRACT4縮略詞表8第一部分實(shí)驗(yàn)研究9第一章小鼠毛囊特異性表達(dá)載體pCDsRUKA的構(gòu)建91材料。1011主要儀器設(shè)備1012實(shí)驗(yàn)試劑與耗材1013菌種和質(zhì)粒1O14組織材料j1015基因合成與測(cè)序102方法ll21小鼠KGF基因的分子克隆以及pBIUO—KGF克隆載體的構(gòu)建1122小鼠UHS基因啟動(dòng)子的克隆以及pMDIUHS克隆載體的構(gòu)建1423中間表達(dá)載體p

3、BUK的構(gòu)建。1624毛囊特異性表達(dá)載體pCDsR—UKA表達(dá)載體的構(gòu)建。173結(jié)果。l831小鼠肝臟組織總RNA的制備。1832小鼠KGF全長(zhǎng)eDNA片段的獲得1833小鼠KGF的T_A克隆及其正向篩選1934小鼠KGF的PCR產(chǎn)物測(cè)序以及比對(duì)結(jié)果1935小鼠UHS啟動(dòng)子的克隆以及測(cè)序BLAST結(jié)果1936中間載體pBUK的酶切鑒定分析2037重組載體pCDsRUK的酶切分析以及BGHpoIyA尾的基因合成2038毛囊特異性表達(dá)載體p

4、CDsRUKA的酶切鑒定。224討論：135結(jié)論24參考文獻(xiàn)。25第二章小鼠胚胎成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層制備及Es細(xì)胞的轉(zhuǎn)染條件優(yōu)化271jl；|『料。2811主要儀器設(shè)備。2812實(shí)驗(yàn)材料及細(xì)胞系2813主要試劑和耗材2814溶液配方282方法。3021小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF)飼養(yǎng)層的制備3022小鼠胚胎干細(xì)胞的復(fù)蘇、傳代及凍存培養(yǎng)。3123ES細(xì)胞的生物學(xué)特性檢測(cè)3224pCDsRUKA表達(dá)載體的酶切線性化及純化。3425脂質(zhì)體Lipo