TWIST2基因?qū)盒阅z質(zhì)瘤SHG44細(xì)胞株侵襲和遷移的影響.pdf

1、分類號(hào)：密級(jí)：UDC：學(xué)號(hào)：416531615779南昌大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文TWIST2基因?qū)盒阅z質(zhì)瘤基因?qū)盒阅z質(zhì)瘤SHG44細(xì)胞株侵襲和遷細(xì)胞株侵襲和遷移的影響移的影響EffectofTWIST2geneoninvasionmigrationofSHG44maligantgliomacellline王黎珍培養(yǎng)單位（院、系）：南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院指導(dǎo)教師姓名、職稱：梅金紅教授主任醫(yī)師申請(qǐng)學(xué)位的學(xué)科門類：醫(yī)學(xué)學(xué)科專業(yè)名稱：臨床病理學(xué)論文答

2、辯日期：2018年5月答辯委員會(huì)主席：李里香評(píng)閱人：王紅梅馮瓊2018年5月摘要II摘要目的：目的：檢測(cè)Twist2在人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞系中的表達(dá)情況；觀察Twist2是否影響惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞的侵襲和遷移作用，探討Twist2是否通過上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EpithelialmesenchymaltransitionEMT）發(fā)揮作用。方法：方法：1、首先運(yùn)用qPCR、Westernblot檢測(cè)Twist2基因和蛋白在四株惡性人腦膠質(zhì)瘤U87、U118

3、、H4、SHG44細(xì)胞系中的表達(dá)情況；2、選取上述細(xì)胞系中Twist2基因和蛋白表達(dá)水平最高的SHG44細(xì)胞系為研究對(duì)象。用沉默Twist2基因質(zhì)粒的慢病毒感染惡性膠質(zhì)瘤SHG44細(xì)胞系。將實(shí)驗(yàn)分三組：第一組：空白組（Blank）；第二組：Twist2沉默陰性對(duì)照組（NCsh）；第三組：沉默Twist2基因組（Twist2sh）；運(yùn)用qPCR、Westernblot分別檢測(cè)各組細(xì)胞Twist2mRNA和蛋白表達(dá)情況。3、Transwel

4、l小室侵襲法、遷移法檢測(cè)各組細(xì)胞侵襲遷移能力；CCK8法檢測(cè)各組細(xì)胞的增殖能力變化；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組細(xì)胞的凋亡情況。4、利用免疫熒光法在激光共聚焦顯微鏡下檢測(cè)各組細(xì)胞NFκBp65蛋白的核轉(zhuǎn)位情況。5、Westernblot檢測(cè)各組細(xì)胞EMT相關(guān)蛋白Ecadherin、Ncadherin、Vimentin和Fibronectin蛋白表達(dá)水平。結(jié)果：結(jié)果：1、Twist2mRNA和蛋白在人惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞系U87、U118、H4、SHG4