柿子渣單寧的制備及生理活性的研究.pdf

1、柿子中含有大量的單寧類(lèi)物質(zhì)，在柿子產(chǎn)品加工的過(guò)程中，大部分的單寧隨果皮和果肉轉(zhuǎn)移到果渣中。本文以柿子果酒釀造廢棄物為原料，對(duì)柿子渣中單寧的提取、純化、抗氧化活性進(jìn)行了研究，并且研究了柿子渣中單寧對(duì)高脂血癥小鼠的降血脂以及護(hù)肝作用。主要研究?jī)?nèi)容如下:
　　1.柿子渣單寧的提取。以有機(jī)溶劑浸提法對(duì)柿子渣單寧的提取工藝進(jìn)行研究，通過(guò)單因素試驗(yàn)確定提取條件，并采用響應(yīng)面法對(duì)其進(jìn)行優(yōu)化。有機(jī)溶劑浸提法的最佳提取工藝為:乙醇濃度為40％，料液

2、比為1∶16，提取時(shí)間為74min，提取溫度為85℃，在此條件下每克柿子渣提取的單寧的含量為26.66mg。
　　2.柿子渣單寧的純化。采用大孔樹(shù)脂純化柿子渣單寧的粗提物，比較5種樹(shù)脂對(duì)柿子渣單寧的粗提物的靜態(tài)吸附率和解吸率，最終選擇AB-8型大孔樹(shù)脂對(duì)柿子渣單寧的粗提物進(jìn)行純化，并對(duì)AB-8型樹(shù)脂進(jìn)行了靜態(tài)吸附和解吸動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)，得出最佳吸附時(shí)間為4h，最佳解吸時(shí)間為2h。并對(duì)其純化工藝進(jìn)行優(yōu)化，優(yōu)化后的條件為:樣液濃度為0.12

3、5倍原液，樣液pH為5，洗脫溶劑乙醇的體積分?jǐn)?shù)為70％，純化后柿子渣單寧純度達(dá)52.78％。
　　3.柿子渣單寧體外抗氧化活性研究。本試驗(yàn)以葡萄籽原花青素作對(duì)照，測(cè)定了柿子渣單寧對(duì)DPPH、ABTS+和羥基自由基的清除能力;同時(shí)還對(duì)柿子渣單寧總還原能力和對(duì)β-胡蘿卜素的護(hù)色能力進(jìn)行了試驗(yàn)研究。結(jié)果顯示，柿子渣單寧均表現(xiàn)強(qiáng)于葡萄籽原花青素的抗氧化能力，且具有明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系。
　　4.柿子渣單寧對(duì)高脂血癥小鼠降血脂作用的研究

4、。試驗(yàn)設(shè)陰性對(duì)照組、高脂模型組和單寧低、中、高劑量組，劑量組分別為100、200、400mg/ (kg·bw)，高脂模型組以等體積的高脂乳劑灌胃，連續(xù)灌胃5周，試驗(yàn)結(jié)束后檢測(cè)小鼠血清T-CHO、TG、LDL-C和HDL-C。結(jié)果顯示，與陰性對(duì)照組相比，高脂模型組小鼠血清中T-CHO、TG、LDL-C的含量顯著升高，HDL-C的含量顯著降低，說(shuō)明造模成功。柿子渣單寧低、中、高劑量組可明顯降低血清中T-CHO、TG、LDL-C的含量，升高H

5、DL-C的含量。說(shuō)明柿子渣單寧對(duì)高血脂癥小鼠有很好的降血脂作用。
　　5.柿子渣單寧對(duì)高脂血癥小鼠護(hù)肝作用的研究。通過(guò)檢測(cè)小鼠肝臟組織中T-CHO、TG、LDL-C和HDL-C，分析柿子渣單寧對(duì)高脂血癥小鼠肝功能指標(biāo)的影響，并對(duì)肝臟組織進(jìn)行病理組織形態(tài)學(xué)檢查。試驗(yàn)結(jié)果表明，與陰性對(duì)照組相比，高脂模型組小鼠肝臟組織中T-CHO、TG、LDL-C的含量顯著升高，HDL-C的含量顯著降低，柿子渣單寧低、中、高劑量組可明顯降低肝臟組織中T

6、-CHO、TG、LDL-C的含量，升高HDL-C的含量。說(shuō)明柿子渣單寧對(duì)高血脂癥小鼠有一定的護(hù)肝作用。觀察肝臟組織病理切片，可以看出高脂血癥模型組小鼠肝臟受到損傷，肝細(xì)胞排列紊亂，且出現(xiàn)輕微的脂肪變性，而柿子渣單寧劑量組肝臟的形態(tài)有所改善，肝小葉的結(jié)構(gòu)趨于正常，排列更加整齊，脂肪變性程度有所緩解，總體表現(xiàn)出較好的改善肝臟中脂質(zhì)指標(biāo)、保護(hù)受損肝臟的作用。
　　6.柿子渣單寧體內(nèi)抗氧化活性研究。通過(guò)檢測(cè)高脂血癥小鼠血液和肝臟中MDA的

7、含量以及SOD、GSH和GSH-PX的活力，與陰性對(duì)照組相比，高脂模型組小鼠的MDA含量顯著升高，而SOD、GSH和GSH-PX的活力明顯降低。與高脂模型組相比，柿子渣單寧低、中、高劑量組小鼠血液和肝臟抗氧化指標(biāo)均有不同程度的改善，低劑量小鼠血液中SOD、GSH和GSH-PX的活力分別升高了11.4％、38％、3.12％，MDA的含量降低了14.3％，組織中SOD、GSH和GSH-PX的活力分別升高了7.1％、14.6％、10.8％，M