吲哚美辛對COPD營養(yǎng)不良模型大鼠骨骼肌泛素-蛋白酶體途徑的影響.pdf

1、目的:觀察COPD營養(yǎng)不良模型大鼠骨骼肌泛素一蛋白酶體途徑泛素mRNA、蛋白酶體20S C2亞基mRNA的表達(dá)；探討吲哚美辛(IND)對該途徑的影響及其篩選合適的劑量,為吲哚美辛治療COPD營養(yǎng)不良提供實驗依據(jù)。
　　 方法:100,只健康雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為模型組(n=80)和對照組(n=20)。模型組大鼠采用熏香煙聯(lián)合氣道內(nèi)滴注豬胰彈性蛋白酶(PPE)法建立COPD模型,對照組不熏香煙,在模型組氣管內(nèi)注入PPE的同時

2、氣道內(nèi)滴注等量生理鹽水。模型建成后第8天,以模型組大鼠體重低于對照組大鼠平均體重的90％作為判斷營養(yǎng)不良的標(biāo)準(zhǔn),篩選出營養(yǎng)不良大鼠,將模型組重新分為COPD營養(yǎng)正常組(n=37)和COPD營養(yǎng)不良組(n=40)。COPD營養(yǎng)不良組按照隨機(jī)區(qū)組設(shè)計分為四組:假干預(yù)組以及干預(yù)(1,2,3)組。干預(yù)(1,2,3)組大鼠采用不同劑量的吲哚美辛溶液(分別為0.5mg/kg·d,1.0mg/kg·d,2.0mg/kg·d)連續(xù)灌胃干預(yù)14天；對照組

3、、COPD營養(yǎng)正常組、假干預(yù)組同時予以等量等滲鹽水連續(xù)灌胃干預(yù)14天。干預(yù)結(jié)束后繼續(xù)飼養(yǎng)大鼠14天。稱量大鼠體重,行肺功能檢查后處死所有大鼠,行肺組織病理學(xué)檢查,取膈肌和伸趾長肌并記錄濕重,采用RT-PCR技術(shù)測定大鼠膈肌和伸趾長肌泛素mRNA、蛋白酶體20S C2亞基mRNA豐度表達(dá)。
　　 結(jié)果:(1)干預(yù)前后大鼠體重變化比較:吲哚美辛干預(yù)2組大鼠體重增長高于干預(yù)1、3組以及假干預(yù)組,有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05)。干預(yù)1、

4、3組間比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；干預(yù)1、3組較假干預(yù)組稍有增高而低于對照組與COPD營養(yǎng)正常組,有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05)。(2)大鼠膈肌、伸趾長肌濕重比較:干預(yù)三組均較假干預(yù)組高,干預(yù)2組最明顯,有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05),干預(yù)1、3組間無明顯差異；以上四組均低于對照組及COPD營養(yǎng)正常組(P均<0.05)。(3)膈肌和伸趾長肌的泛素mRNA、蛋白酶體20S C2亞基mRNA表達(dá)比較:干預(yù)2組低于干預(yù)1、3組、假干預(yù)組

5、、COPD營養(yǎng)正常組,而高于對照組,均有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05)；干預(yù)1、3組低于假干預(yù)組而高于COPD營養(yǎng)正常組及對照組,有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05),而兩組間比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。(4)膈肌與伸趾長肌的泛素mRNA表達(dá)與兩種組織濕重分別呈負(fù)相關(guān),(分別為R=-0.865,P<0.01；R=-0.849,P<0.01)；同樣,蛋白酶體20S亞基C2mRNA的表達(dá)分別與兩種骨骼肌的濕重呈負(fù)相關(guān),(分別為R=-0.814

6、,P<0.01；R=-0.856,P<0.01)。
　　 結(jié)論:1.泛素-蛋白酶體成分泛素mRNA、蛋白酶體C2亞基mRNA在COPD營養(yǎng)不良模型大鼠膈肌、伸趾長肌中表達(dá)增高,其表達(dá)量與膈肌、伸趾長肌濕重呈負(fù)相關(guān)。2.不同劑量的吲哚美辛對泛素和蛋白酶體C2亞基的mRNA表達(dá)影響不同,提示吲哚美辛通過對泛素一蛋白酶體途徑的影響可不同程度的增加或減少骨骼肌蛋白質(zhì)的降解量,可以認(rèn)為適當(dāng)劑量的吲哚美辛可以對抗泛素-蛋白酶體途徑的表達(dá)增高