IgA1糖基化和組蛋白乙酰化參與IgA腎病發(fā)病的研究.pdf

1、IgA腎病(IgAN)是全世界范圍內最常見的腎小球腎炎，是引起腎衰竭的重要病因。IgAN臨床表現多樣，其發(fā)病機制至今仍不完全清楚。半乳糖缺失的IgA1(Gd-IgA1)是唯一能與IgG或IgA1結合形成免疫復合物的成分。Gd-IgA1可以自身積聚或與IgG或抗Gd-IgA1的抗體結合形成免疫復合物沉積在腎小球系膜區(qū)。這些沉積的免疫復合物可以活化系膜細胞，促進其增殖和分泌細胞外基質，釋放細胞因子和炎癥趨化因子，從而引起腎臟損傷。因此，含有

2、Gd-IgA1的免疫復合物形成是IgAN發(fā)病機制的關鍵因素之一。IgA1的糖基化修飾與半乳糖基轉移酶(C1GALT1)和唾液酸轉移酶(ST6GALNAC2)密切相關。
　　IgAN是由多基因和環(huán)境因素共同發(fā)揮作用的復雜性疾病。表觀遺傳學通過調節(jié)基因和環(huán)境的相互作用從而影響著人類的疾病。組蛋白乙?；揎検亲钤绨l(fā)現的組蛋白修飾方式，其在IgAN的發(fā)病機制中的作用尚不清楚。本課題擬通過體內及體外研究探討IgA1糖基化異常及組蛋白乙酰化修

3、飾異常在IgAN發(fā)病過程中的作用。
　　研究發(fā)現IgAN組較健康對照組血漿IgA和Gd-IgA1水平均顯著升高(均P＜0.0001)。相關性分析發(fā)現:IgAN患者血漿Gd-IgA1水平與24h尿蛋白定量呈正相關(r=0.479，P＜0.001)。IgAN組外周血單個核細胞(peripheral blood mononuclearcell，PBMC)C1GALT1 mRNA的表達量是健康對照組的0.38±0.07倍(P＜0.01)，

4、ST6GALNAC2的mRNA表達量是健康對照組的2.31±0.48倍(P＜0.05)。與健康對照組比較，IgAN組外周血PBMC的組蛋白H3乙?；斤@著升高(P＜0.05)，H4乙?；斤@著升高(P＜0.01)。IgAN組PBMC的組蛋白乙?；D移酶P300、CREBBP mRNA的表達明顯升高，分別是健康對照組的2.81±0.39倍和2.44±0.27倍（均P＜0.01）;組蛋白去乙?；窰DAC1、HDAC2、HDAC3、HD

5、AC7和HDAC8 mRNA的表達量分別是健康對照組的2.20±0.18倍(P＜0.001)、0.44±0.08倍(P＜0.05)、0.98±0.18倍(P＞0.05)、1.02±0.21倍(P＞0.05)和1.47±0.25倍(P＜0.05)。IgAN患者PBMC中C1GALT1基因啟動子區(qū)域組蛋白H3、H4乙?；潭容^健康對照組顯著降低，分別為健康對照組的0.43±0.20倍(P＜0.05)和0.62±0.11倍(P＜0.01);S

6、T6GALNAC2基因啟動子區(qū)域組蛋白H3、H4乙?；潭染@著升高，分別為健康對照組3.42±1.32倍(P＜0.05)和2.07±0.29倍(P＜0.05)。腎臟組織免疫熒光顯示:IgAN患者腎組織中HDAC1明顯上調而H3Ac蛋白顯著減少，呈低乙?；癄顟B(tài)。
　　體內研究發(fā)現:IgAN患者血漿中的MCP-1、TNF-α(均P＜0.01)蛋白表達水平升高。IgAN患者PBMC的MCP-1，TNF-α，NF-κB，IL-1β和IL

7、-6的mRNA表達均顯著升高，分別為健康對照組的3.52±0.89倍(P＜0.05)、4.16±0.55倍(P＜0.001)、1.80±0.35倍(P＜0.05)、1.41±0.49(P＞0.05)和2.56±0.22倍(P＜0.01)。進一步應用人炎癥因子蛋白芯片觀察不同IgA1[健康對照者來源的單體IgA1（N-IgA1）、健康對照者來源的聚合體IgA1（N-aIgA1）、IgAN患者來源的單體IgA1（P-IgA1）和IgAN患者

8、來源的聚合體IgA1（P-aIgA1）]及PBS對照組（control組，即加入同體積的0.01mol/L PBS）對體外培養(yǎng)的人系膜細胞(HMC)炎癥因子表達的影響。結果發(fā)現:P-aIgA1組細胞上清液IL-6sR、TNF-α、RANTES、TIMP-1、TIMP-2和TNF RII顯著上調;P-aIgA1能夠顯著促進HMC的增殖。應用Western blot法發(fā)現不同IgA1均可上調HMC HDAC1蛋白表達，尤以P-aIgA1組最

9、為明顯。用HDACl抑制劑丙戊酸鈉(VPA)干預可以減少上述炎癥因子的表達，抑制P-aIgA1引起的HMC的增殖。
　　研究發(fā)現P-aIgA1能夠顯著促進HMC合成細胞外基質，上調纖溶酶原激活物抑制劑（PAI-1）的表達;VPA能夠下調HDAC1的表達，上調H3Ac的表達，提高系膜細胞乙?；?，顯著減少細胞外基質的合成，
　　上述研究結果顯示IgAN患者存在組蛋白乙?；揎棶惓?組蛋白乙酰化修飾參與了IgA1糖基化過程;P