維生素K3聯(lián)用氯喹增強神經膠質瘤細胞內質網應激介導的細胞凋亡作用研究.pdf

1、一直以來通過增加腫瘤細胞的應激水平是治療腫瘤的一個基本方法，之前的研究表明，氧化應激能夠破壞線粒體的功能，從而促進引起線粒體膜通透性增加，引發(fā)細胞色素 C的釋放，利用藥物誘導氧化應激是治療腫瘤的一個有效的措施。維生素 K3能夠誘導 ROS的生成，促進腫瘤細胞的凋亡，被認為是一種潛在的抗腫瘤藥物。最近的研究表明內質網是另一種凋亡的來源，錯誤折疊蛋白的堆積引發(fā)的內質網應激能夠最終誘導細胞的凋亡。ROS通過影響內質網鈣平衡和對酶的氧化修飾能夠

2、引發(fā)內質網應激。
　　目的:用維生素K3作用于神經膠質瘤細胞，同時聯(lián)用自噬抑制劑氯喹來抑制錯誤折疊蛋白的降解來加劇內質網應激，達到更大程度殺傷神經膠質瘤細胞的目的。
　　方法：采用神經膠質瘤細胞U251為研究對象，用維生素K3誘發(fā)內質網應激，同時利用氯喹抑制錯誤折疊蛋白的降解來加劇內質網應激。1.采用MTT觀察VK3作用下以及VK3和氯喹聯(lián)用下U251細胞的存活率；2.采用Western blot方法檢測單獨使用VK3以及V

3、K3聯(lián)用氯喹時內質網應激相關蛋白GRP78的變化，以及泛素化蛋白，下游凋亡蛋白CHOP和caspase4/5的變化。
　　結果:1.維生素K3能夠通過增加泛素化蛋白顯著的增加內質網應激蛋白GRP78的表達并且具有時間依賴性，表明VK3能夠誘導內質網應激。2.在VK3聯(lián)用氯喹時，MTT結果表明細胞的生存率顯著降低，表明氯喹能夠增加VK3的殺傷腫瘤的作用。3. Western blot結果顯示，氯喹聯(lián)用VK3時泛素化蛋白的量增加，內質