紅細胞生成素對慢性腎衰竭大鼠內(nèi)皮祖細胞動員和腎臟修復(fù)的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:研究促紅細胞生成素(erythropoietin，EPO)對慢性腎衰竭(chronic renalfailure，CRF)大鼠外周血內(nèi)皮祖細胞(endothelial progenitor cells，EPCs)的數(shù)目和功能的影響，以及對腎臟的修復(fù)作用。
　　 方法:采用分階段5/6腎切除術(shù)制備大鼠慢性腎功能衰竭動物模型。實驗動物隨機分為4組：假手術(shù)組(Control)，慢性腎衰竭組(模型組)及rHuEPO干預(yù)的兩個劑量亞

2、組(小劑量組和大劑量組)。慢性腎衰竭大鼠皮下注射rHuEPO6周后，密度梯度離心法從大鼠心臟血中分離單個核細胞，接種于鋪有纖維連接蛋白的培養(yǎng)瓶內(nèi)，給予含有血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)等的M199培養(yǎng)基。通過流式檢測細胞表面標(biāo)記CD34，CD133和KDR以及免疫熒光檢測細胞內(nèi)吞UEA-1和結(jié)合acLDL來鑒定EPCs，并檢測EPCs增值、粘附及形成血管結(jié)構(gòu)的能力。用免疫組化檢測腎組織CD34+細胞數(shù)目、腎小球CAP內(nèi)皮細胞密度，用RT-

3、PCR檢測腎組織eNOS、ET1、TGF-β、COLⅣmRNA的表達，檢測Scr、BUN、尿蛋白指標(biāo)并觀察腎組織病理改變。
　　 結(jié)果:內(nèi)皮祖細胞的鑒定用激光共聚焦顯微鏡觀察，顯示細胞DiI-acLDL和FITC-UEA-1呈免疫雙熒光陽性。應(yīng)用rHuEPO治療能顯著增加殘腎模型大鼠EPC增值、粘附及形成血管結(jié)構(gòu)的能力(P＜0.05)，顯著增加腎組織CD34+細胞的數(shù)目以及腎小球毛細血管內(nèi)皮細胞密度(P＜0.05)，上調(diào)腎組織e

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