微囊化兔坐骨神經(jīng)組織細胞移植對大鼠脊髓損傷后NF-κB及IκBα表達變化的影響.pdf

1、目的：本實驗通過觀察和分析微囊化兔坐骨神經(jīng)組織細胞移植對大鼠急性脊髓損傷后NF-κB因子及IκBα表達變化的影響，探討微囊化兔坐骨神經(jīng)組織細胞移植治療促進大鼠急性脊髓損傷功能恢復的作用和分子機理，為微囊化兔坐骨神經(jīng)組織細胞移植治療脊髓損傷提供理論和實驗依據(jù)。 方法：取Sprague Dawley（SD）大白鼠120只，體重220～250g，雌雄不拘；健康成年家兔10只，體重2000～2500g，雌雄不拘。隨機分為4組：A組（微囊

2、化坐骨神經(jīng)組織細胞移植組，n=36）；B組（組織細胞懸液移植組，n=36）；C組（單純損傷組，n=36）；D組（假手術組，n=12）。對各組大鼠行右后肢運動功能BBB評分。無菌條件下取成年家兔預變性處理的雙側(cè)坐骨神經(jīng)干制成組織細胞懸液，低速離心后與1.5％海藻酸鈉溶液混合并噴入20mmol/L的氯化鋇溶液中制成微囊化坐骨神經(jīng)組織細胞懸液。A、B、C組建立大鼠T10脊髓右半橫斷損傷模型，并分別在損傷處移入吸附10μl的微囊化組織細胞懸液的

3、明膠海綿、組織細胞懸液的明膠海綿及明膠海綿，D組只去除椎骨，不損傷脊髓也不移植。術后6h、12h、24h、3d、7d、14d，每個時相點取6只SD大鼠行右后肢運動功能BBB評分后麻醉用4％多聚甲醛經(jīng)左心灌注，截取移植部位或損傷節(jié)段約1cm長脊髓組織。石蠟切片后行尼氏體染色（Niss1染色）、NF-κB和IκBα的過氧化物酶標記的鏈霉卵白素（Streptavidin/Peroxidase，SP）染色。 結果：術后隨時間延長各組動物

4、后肢運動功能均有不同程度的恢復，但都未達到正常水平：3天內(nèi)各組間BBB評分無顯著性差異；而7天后A組和B組大鼠運動功能恢復較好，BBB評分較高，與其它組比較均有顯著性差異（P<0.05），且A組比B組恢復更好（P<0.05）。SCI后神經(jīng)元數(shù)量減少，尼氏體脫失、溶解：術后第7天及第14天微囊組Niss1染色神經(jīng)元數(shù)量顯著增多（P<0.05）。NF-κB陽性細胞主要見于神經(jīng)元細胞漿及細胞核內(nèi)等。大鼠脊髓損傷后上述細胞NF-κB表達增加，2

5、4h達高峰水平，3d后開始逐漸降低，7d基本降至正常。微囊組與單損組、細胞組比較差異顯著（P<0.05）。而IκBα陽性細胞主要見于神經(jīng)元細胞及膠質(zhì)細胞的胞漿內(nèi)。大鼠脊髓損傷后上述細胞IκBα表達降低，24h降到最低點，3d后表達開始回升，7d逐步恢夏正常水平。微囊組與單損組、細胞組比較差異顯著（P<0.05）。 結論：微囊化兔坐骨神經(jīng)組織細胞移植對脊髓損傷后NF-κB的活性表達起抑制作用還可以抑制IκBα磷酸化降解環(huán)節(jié)，對于減