304-Cu抗菌不銹鋼材料的細(xì)胞毒性評(píng)價(jià).pdf

1、矯治裝置是正畸臨床治療中最常用的功能部件,包括:托槽、帶壞、弓絲、矯治附件和正畸支抗種植體等。矯治裝置材料的性能可以影響矯治力的施加效果,對(duì)提高矯治質(zhì)量和縮短矯治療程起到重要的作用。目前臨床上應(yīng)用的多數(shù)矯治裝置是由醫(yī)用不銹鋼材料制成,它具有優(yōu)良的力學(xué)性能,耐腐蝕性和良好的可加工性。但醫(yī)用不銹鋼本身不具有抗菌作用,當(dāng)這些矯正裝置應(yīng)用于口腔環(huán)境后,降低了口腔自潔作用,破壞了口腔正常菌群的生態(tài)平衡,菌斑易于堆積于矯治裝置周?chē)?不利于口腔衛(wèi)生的

2、保持,容易導(dǎo)致齲病,牙齦炎,牙周炎,支抗種植體周?chē)椎燃?xì)菌感染性疾病,不僅危害患者健康,更延長(zhǎng)了矯治的過(guò)程。近年來(lái),中國(guó)科學(xué)院金屬研究所研制出304-Cu抗菌不銹鋼,它具有普通不銹鋼的優(yōu)良性能,而且它的抗菌有效性已經(jīng)過(guò)諸多實(shí)驗(yàn)研究被證實(shí)。本實(shí)驗(yàn)旨在評(píng)價(jià)抗菌不銹鋼材料的細(xì)胞毒性,并與臨床常用的醫(yī)用不銹鋼材料以及純鈦材料進(jìn)行比較,為其進(jìn)一步的臨床應(yīng)用提供生物學(xué)證據(jù)。
　　 方法：
　　 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)的方法對(duì)材料進(jìn)行研究

3、,選擇L-929細(xì)胞系作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,將實(shí)驗(yàn)材料分為普通不銹鋼、抗菌不銹鋼、純鈦三個(gè)實(shí)驗(yàn)組,并設(shè)立空白對(duì)照組和陽(yáng)性對(duì)照組。通過(guò)細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察、CCK-8實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)抗菌不銹鋼材料對(duì)細(xì)胞毒性的影響。在三種材料的浸提液與細(xì)胞作用24 h、48 h、72 h后,用倒置相差顯微鏡觀察L-929細(xì)胞的數(shù)量、形態(tài)以及生長(zhǎng)情況;通過(guò)CCK-8實(shí)驗(yàn)得出光密度值并計(jì)算得出細(xì)胞相對(duì)增值率,判斷細(xì)胞毒性級(jí)別;通過(guò)流式細(xì)胞儀Annexin V-FIT

4、C/PI雙染法觀察在不同合金浸提液中培養(yǎng)的小鼠成纖維細(xì)胞的散點(diǎn)圖,并計(jì)算各組細(xì)胞凋亡率,對(duì)抗菌不銹鋼材料做出細(xì)胞毒性評(píng)價(jià)。
　　 倒置相差顯微鏡觀察結(jié)果:培養(yǎng)24 h,普通不銹鋼組,抗菌不銹鋼組,純鈦組,空白對(duì)照組細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)狀態(tài)良好;陽(yáng)性對(duì)照組細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)異常。培養(yǎng)48h,普通不銹鋼組,抗菌不銹鋼組,純鈦組,空白對(duì)照組細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛,排列密集規(guī)則;陽(yáng)性對(duì)照組細(xì)胞固縮。培養(yǎng)72 h,普通不銹鋼組,抗菌不銹鋼組,純鈦組,空白對(duì)照組細(xì)

5、胞布滿視野,未見(jiàn)異型性;陽(yáng)性對(duì)照組均為死亡細(xì)胞和碎片。
　　 CCK-8實(shí)驗(yàn)結(jié)果:隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),普通不銹鋼組,抗菌不銹鋼組,純鈦組,空白對(duì)照組的光密度值均相應(yīng)的增加。各時(shí)點(diǎn)普通不銹鋼組,抗菌不銹鋼組的光密度值均低于純鈦組和空白對(duì)照組(P＜0.05),但普通不銹鋼組,抗菌不銹鋼組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。空白對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞毒性均為0級(jí),純鈦組,普通不銹鋼組,抗菌不銹鋼組各時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞毒性均為1級(jí)。
　　

6、流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:各組細(xì)胞均以正常細(xì)胞和凋亡細(xì)胞為主,壞死細(xì)胞較少。凋亡細(xì)胞在各組間分布不均,普通不銹鋼和抗菌不銹鋼組的凋亡細(xì)胞多于空白對(duì)照組。細(xì)胞凋亡率在普通不銹鋼、抗菌不銹鋼組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05),但這兩組的細(xì)胞凋亡率均高于空白對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 抗菌不銹鋼材料對(duì)L-929細(xì)胞具有良好的生物相容性,與醫(yī)用普通不銹鋼材料的細(xì)胞毒性無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,符合口腔正畸材料的