犬三種白內(nèi)障模型的建立和氧化損傷性白內(nèi)障發(fā)展進(jìn)程中AQPO表達(dá)的研究.pdf

1、目的:通過探究犬三種白內(nèi)障模型的建立并比較三種模型的優(yōu)缺點(diǎn)，選擇一種白內(nèi)障模型作為續(xù)試驗(yàn)，并檢測(cè)該模型白內(nèi)障發(fā)展進(jìn)程與AQP0表達(dá)之間的關(guān)系，探索AQP0對(duì)白內(nèi)障形成的影響。
　　方法:(1)將60只平均年齡6月左右本地雜交犬，隨機(jī)分為6組，分別為氧化損傷性(Fenton)白內(nèi)障模型組、糖尿病性(STZ)白內(nèi)障模型組、硒性（亞硒酸鈉）白內(nèi)障模型組和各模型對(duì)照組，每組10只。每日用裂隙燈觀察并拍照，根據(jù)LOCSⅢ分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)記錄晶狀體的

2、結(jié)構(gòu)變化并分級(jí)。(2)選取40只本地雜交犬隨機(jī)分為2組，分模型組和對(duì)照組，每組20只，根據(jù)LOCSⅢ分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)白內(nèi)障的形成過程進(jìn)行分級(jí)，并在模型組每級(jí)形成的時(shí)間節(jié)點(diǎn)上使用RT-PCR方法檢測(cè)晶狀體中AQP0的表達(dá)量。
　　結(jié)果:(1)硒性白內(nèi)障模型，糖尿病性白內(nèi)障模型和氧化損傷性白內(nèi)障模型分級(jí)形成時(shí)間分別為C1(d):1±0.32、30±2.0和7±0.8。C2(d)分別為5±0.36、60±2.5和10±0.68。C3(d)分別

3、為11±0.48、150±6.25和15±1.0。C4(d)分別為0、180±6.5和24±1.54。C5(d)分別為0、240±12和48±1.52。硒性白內(nèi)障造模時(shí)間最短，但毒性過大，死亡率高達(dá)100％，氧化損傷性白內(nèi)障較糖尿病性白內(nèi)障成模時(shí)間短。(2)硒性白內(nèi)障C1形成時(shí)的犬只數(shù)量為10只，糖尿病性白內(nèi)障為7只，氧化損傷性白內(nèi)障模型為10只。C2形成時(shí)的犬只數(shù)量依次為10只、4只和10只。C3形成時(shí)依次為10只、3只和10只。C4

4、形成時(shí)依次為0只、3只和10只。C5形成時(shí)依次為0只、3只和10只。三種白內(nèi)障模型對(duì)照組均為0只。氧化性白內(nèi)障模型的成模穩(wěn)定性較糖尿病性和硒性好。(3)三種造模方式均具可操縱性，而氧化損傷性白內(nèi)障較糖尿病性和硒性略難。(4)三種白內(nèi)障模型裂隙燈的觀察:硒性白內(nèi)障在注射亞硒酸鈉生理鹽水后1d后出現(xiàn)試驗(yàn)犬雙眼皮質(zhì)較多點(diǎn)狀混濁，5d后點(diǎn)狀混濁加深相連成散瞳后可見皮質(zhì)及周圍橢圓形陰影，大量空泡，11d后陰影面積擴(kuò)大形成片狀，空泡量增多，陰影區(qū)眼

5、底細(xì)節(jié)不清晰。糖尿病性白內(nèi)障注射STZ后30d出現(xiàn)晶狀體少量的小囊泡，60d后小囊泡增多成群，150d后小囊泡連成片狀陰影，并由四周向赤道部伸展，陰影部眼底細(xì)節(jié)不清晰，180d后皮狀陰影加深，范圍擴(kuò)大，陰影眼底細(xì)節(jié)不可見，240d后晶狀體皮質(zhì)及核質(zhì)完全呈灰白色混濁。氧化性白內(nèi)障注射Fenton后第7d形成晶狀體皮質(zhì)點(diǎn)狀分布的小白點(diǎn)陰影但可觀察眼底，注射后第10d晶狀體皮質(zhì)點(diǎn)狀分布的小白點(diǎn)漸漸加深變大形成扇形分布的白色陰影，注射后第15d

6、晶狀體皮質(zhì)扇形分布的白色陰影加深，范圍繼續(xù)擴(kuò)大形成片狀，注射后24d片狀白色陰影擴(kuò)展至晶狀體整個(gè)皮質(zhì)，注射后第48d侵蝕形成成熟的皮質(zhì)性白內(nèi)障。(5)氧化損傷性白內(nèi)障模型發(fā)展進(jìn)程中AQP0表達(dá)量變化的數(shù)據(jù)處理采用相對(duì)定量的△△Ct法，根據(jù)各個(gè)基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過測(cè)試樣的CT值得到相對(duì)應(yīng)的數(shù)據(jù)，以此比較Fenton注射的氧化性白內(nèi)障形成后的7d、10d，15d、24d、30d、40d、48d的AQP0表達(dá)量變化。AQP0表達(dá)量在第7d為1