降鈣素基因相關肽對高糖孵育乳鼠心肌細胞缺氧-復氧損傷的影響.pdf

1、學位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學位論文系在導師指導下本人獨立完成的研究成果。文中任何引用他人的成果，均已做出明確標注或得到許可。論文內容未包含法律意義上已屬于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人已用于其它學位申請的論文或成果。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。本文如違反上述聲明，愿意承擔以下責任和后果：1 、交回學校授予的學位證書；2 、學?？稍谙嚓P媒體上對作者本人的行為進行通報：3

2、、本文按照學校規(guī)定的方式，對因不當取得學位給學校造成的名譽損害，進行公開道歉。4 、本人負責因論文成果不實產生的法律糾紛。論文作者簽名： 讒賊． 日期：如，多年／月時日學位論文版權使用授權書本人完全了解山西醫(yī)科大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留或向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人授權山西醫(yī)科大學可以將本學位論文的全部或部分內容編入有關數據庫進行檢索，可以采用影印、縮印或其它復制手段保存論

3、文和匯編本學位論文。本人離校后發(fā)表或使用學位論文或與該論文直接相關的學術論文或成果時，署名單位仍然為山西醫(yī)科大學。( 保密論文在解密后應遵守此規(guī)定)論文作者簽名：指導教師簽名：( 本聲明的版權藹，磚 軀歸山西醫(yī)科大學1日期：二新≯年廠月厶f 日日期：加，甲年 鈿／J 一日所有，未經許可，任何單位及任何個人不得擅自使用)山西醫(yī)科大學碩士學位論文降鈣素基因相關肽對高糖孵育乳鼠心肌細胞缺氧／復氧損傷的影響中文摘要目的探討降鈣素基因相關肽( C

4、 a l c i t o n i n G e n e R e l a t e d P e p t i d e ，C G R P ) 預先給藥對正常大鼠心肌細胞以及高糖孵育大鼠心肌細胞缺氧／復氧( A n o x i a - r e o x y g e n a t i o n ，A ／R ) 損傷的影響。方法( 1 ) 乳鼠心肌細胞體外培養(yǎng)與鑒定。選用健康1 ～3 天齡的S D 大鼠，雌雄不拘，用于心肌細胞體外培養(yǎng)模型的建立。采用免疫細胞

5、化學S A B C 法對所培養(yǎng)的心肌細胞進行鑒定。( 2 ) 心肌細胞缺氧／復氧模型的建立。將培養(yǎng)7 2 h 的心肌細胞置于密閉缺氧盒中培養(yǎng)3 h 模擬缺氧，更換培養(yǎng)液后在正常培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2 h 模擬復氧，缺氧／復氧結束后檢測心肌細胞凋亡率。( 3 ) 采用免疫熒光技術對心肌細胞中C G R P 受體的分布進行定位。( 4 ) C G R P 對大鼠心肌細胞缺氧／復氧損傷的影響。采用隨機數字表法，取1 2孔心肌細胞隨機分為4 組( n

6、= 3 ) ：對照組，不加任何藥物干預，并且不進入缺氧／復氧程序；缺氧／復氧組，不加任何藥物干預，只進行缺氧／復氧程序；缺氧／復氧+ C G R P 組，缺氧前1 小時給予C G R P ( 1 0 —8 m o l ／L ) ，之后進入缺氧／復氧程序；缺氧／復氧+ C G R P + C G R P 8 - 3 7 組，缺氧前1 小時給予C G R P ( 1 0 ～m o l ／L ) + c G R P l受體拮抗劑C G R P

7、 8 ．3 7 ( 1 0 。7 m o l ／L ) ，之后進入缺氧／復氧程序。缺氧／復氧損傷后測定心肌細胞凋亡率、乳酸脫氫酶( L D H ) 釋放量以及培養(yǎng)液中半胱氨酸天冬蛋白酶3 ( c a s p a s e ．3 ) 活性。( 5 ) C G R P 對高糖孵育大鼠心肌細胞缺氧／復氧損傷的影響。用低糖和高糖D M E M 培養(yǎng)基孵育原代培養(yǎng)的S D 大鼠心肌細胞建立高糖損傷模型，培養(yǎng)7 2 h后進入缺氧／復氧程序，于缺氧前隨