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1、本論文對黑曲霉CGMCC0774和朱紅密孔菌CGMCC1115聯(lián)合轉(zhuǎn)化米糠油腳中的阿魏酸生產(chǎn)香草醛進行研究。 用米糠油腳水解提取的阿魏酸作為生產(chǎn)香草醛的底物。通過60Co誘變黑曲霉(A.nigr)SW-33,經(jīng)過初篩、復(fù)篩、再復(fù)篩得到一株可耐較高底物濃度的突變株黑曲霉(A.niger)CGMCC0774,三次平均搖瓶轉(zhuǎn)化得到香草酸濃度為2.481g/L,摩爾轉(zhuǎn)化率為71.62%。研究黑曲霉CGMCC0774轉(zhuǎn)化阿魏酸生成香草酸的
2、最適條件為:轉(zhuǎn)化溫度為37℃,轉(zhuǎn)速150r/min,底物阿魏酸濃度為4g/L,pH4.0-4.5,搖瓶裝液量為140mL/250mL。進行黑曲霉CGMCC0774轉(zhuǎn)化阿魏酸生成香草酸15L和25L發(fā)酵罐放大試驗,通過流加底物得到香草酸2.24g/L,摩爾轉(zhuǎn)化率為64.6%。 研究從阿魏酸到香草醛的兩步串聯(lián)轉(zhuǎn)化工藝,黑曲霉轉(zhuǎn)化阿魏酸生成香草酸的轉(zhuǎn)化液過濾除去菌體,調(diào)pH5.0,補加5g/L葡萄糖,滅菌,用培養(yǎng)好的朱紅密孔菌游離菌體
3、轉(zhuǎn)化,產(chǎn)香草醛0.63g/L。研究朱紅密孔菌CGMCC1115反應(yīng)分離耦合轉(zhuǎn)化,當香草酸濃度為4g/L和樹脂加量為20g時,香草醛濃度為2.20g/L,摩爾轉(zhuǎn)化率為60.69%。 將純化后得到的本課題研制香草醛結(jié)晶樣品進行13C同位素測定,其碳13C/12C比率明顯不同于愈創(chuàng)木酚原料化學(xué)合成的香草醛,與Rhovanil(R)Natural(天然等同)相近。 嘗試對朱紅密孔菌細胞固定化的初步研究,轉(zhuǎn)化72h產(chǎn)香草醛0.49
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