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1、目的:研究非酶糖基化終產(chǎn)物(AGEs)對(duì)RF/6A細(xì)胞(猴脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞)缺氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)蛋白表達(dá)的影響,以及AGEs作用下HIF-1α和VEGF蛋白表達(dá)的相關(guān)性。 方法:體外傳代培養(yǎng)RF/6A細(xì)胞。以濃度分別為0mg/L、50mg/L、100mg/L、200mg/L、400mg/L、800mg/L的AGEs與AGEs對(duì)照物干預(yù)融合期生長(zhǎng)的RF/6A細(xì)胞24h,采用免疫細(xì)胞化學(xué)
2、方法和Western blot法檢測(cè)HIF-1α的蛋白表達(dá),取培養(yǎng)細(xì)胞的上清液,采用ELISA法檢測(cè)VEGF蛋白的表達(dá)。 結(jié)果:與AGEs對(duì)照物干預(yù)組相比,AGEs干預(yù)組的HIF-1α和VEGF蛋白表達(dá)顯著增加(p<0.05)。濃度分別為0mg/L、50mg/L、100mg/L、200mg/L的AGEs干預(yù)RF/6A細(xì)胞24h后,HIF-1α和VEGF蛋白的表達(dá)逐漸增加,在200mg/L時(shí)達(dá)到頂峰,但濃度達(dá)400 mg/L、80
3、0 mg/L時(shí),AGEs干預(yù)組HIF-1α和VEGF蛋白的表達(dá)卻逐漸減弱;HIF-1α和VEGF的蛋白表達(dá)呈正相關(guān)性(p<0.05)。而在AGEs對(duì)照物干預(yù)組HIF-1α和VEGF蛋白表達(dá)均較弱,且與濃度無(wú)關(guān)。 結(jié)論:AGEs促使RF/6A細(xì)胞HIF-1α和VEGF的蛋白表達(dá)增加,其表達(dá)與AGEs濃度相關(guān)。HIF-1α和VEGF的蛋白表達(dá)呈正相關(guān)性,AGEs可能通過(guò)HIF-1α提高VEGF蛋白的表達(dá),因此以HIF-1α為藥物靶點(diǎn)
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