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1、我們以MTT法和流式細(xì)胞儀檢測(cè)體TGF-β對(duì)體外培養(yǎng)的氣道平滑肌的增殖的作用,了解TGF-在哮喘氣道重建的一個(gè)重要方面,氣道平滑肌增生的直接作用.MAPK途徑和PI-3K信號(hào)傳遞系統(tǒng)對(duì)氣道平滑肌細(xì)胞進(jìn)入S期有重要作用,是ASM細(xì)胞增殖的重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑.因此該試驗(yàn)通過(guò)MTT和流式細(xì)胞儀的方法觀察TGF-β1對(duì)體外培養(yǎng)的大鼠ASM細(xì)胞增殖作用.應(yīng)用特異性細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/2(ERK1/2)抑制劑U-0126或PI-3K抑制劑LY29
2、4002阻斷細(xì)胞增殖的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,觀察TGF-β1誘導(dǎo)的大鼠ASM細(xì)胞增殖中可能的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,從而更深一步了解TGF-β1誘導(dǎo)的哮喘氣道重建的機(jī)制.一、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1對(duì)大鼠支氣管平滑肌增殖的作用 應(yīng)用體外培養(yǎng)的方法,加入不同濃度的TGF-β1,通過(guò)MTT法和流式細(xì)胞儀觀察其對(duì)ASMC增殖的影響.二、TGF-β1誘導(dǎo)的大鼠ASM細(xì)胞增殖的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑 在該研究中,MTT法和免疫組化圖像分析結(jié)果顯示:預(yù)先30min加入U(xiǎn)-0126明顯
3、抑制了10μg·L<'-1>TGF-β1誘導(dǎo)的ASMC增殖.預(yù)先30min加入LY294002對(duì)ASMC增殖有抑制作用,但統(tǒng)計(jì)學(xué)上無(wú)差別.結(jié)論:1.TGF-β1增加了體外培養(yǎng)的ASMC中S期和G2期細(xì)胞占總細(xì)胞數(shù)的百分比.2.TGF-β1對(duì)氣道平滑肌的增殖有明顯的促進(jìn)作用.3.TGF-β1主要通過(guò)MAPK途徑誘導(dǎo)ASMC增殖,ERK 1/2是關(guān)鍵的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子.4.在一定濃度范圍內(nèi),TGF-β1誘導(dǎo)的phospho-ERK 1/2表達(dá)有
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