褪黑素保護(hù)對(duì)乙酰氨基酚引起的肝細(xì)胞死亡.pdf

1、目的：過量使用對(duì)乙酰氨基酚(APAP)是造成急性肝損傷最常見的原因之一,其主要是由于APAP經(jīng)肝細(xì)胞色素氧化酶P450(CYP)2E1代謝為具有肝毒性的物質(zhì)而引起的。已有文獻(xiàn)證實(shí),褪黑素(MT)對(duì)APAP誘導(dǎo)的急性肝損傷具有保護(hù)作用,然而具體分子機(jī)制仍不清楚。本研究探討了MT減輕凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)介導(dǎo)的肝細(xì)胞死亡在APAP引起急性肝損傷中的作用。
　　方法：APAP組小鼠經(jīng)腹腔注射APAP(300mg/kg),MT+APAP組

2、小鼠注射APAP(300mg/kg)前30min經(jīng)腹腔注射不同劑量的MT(1.25,5,20mg/kg),對(duì)照組給予等容量的生理鹽水或MT。APAP處理后1h或4h剖殺小鼠,取肝臟和血清,采用蛋白免疫印跡、免疫組化、實(shí)時(shí)定量RT-PCR以及生物化學(xué)等方法檢測(cè)相應(yīng)的分子和細(xì)胞指標(biāo)。
　　結(jié)果：TUNEL實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),MT預(yù)處理顯著減輕APAP誘導(dǎo)的肝細(xì)胞死亡。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),MT明顯抑制APAP激活絲氨酸/蘇氨酸激酶受體相互作用蛋白1(

3、RIP1)的活性;MT預(yù)處理抑制APAP引起肝臟c-Jun氨基端激酶(JNK)的磷酸化和Bax的線粒體轉(zhuǎn)位。此外,MT預(yù)處理顯著抑制APAP激活A(yù)IF由線粒體向核內(nèi)的轉(zhuǎn)移。然而,MT預(yù)處理對(duì)APAP上調(diào)肝臟CYP2E1蛋白水平無明顯影響,對(duì)APAP引起肝臟谷胱甘肽(GSH)耗竭也未發(fā)現(xiàn)明顯影響。
　　結(jié)論：MT預(yù)處理通過對(duì)抗APAP激活肝臟RIP1活性、JNK磷酸化和Bax的線粒體轉(zhuǎn)位,繼而抑制AIF入核介導(dǎo)肝細(xì)胞死亡,最終預(yù)防A