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文檔簡介
1、目的: 本實驗采用體外培養(yǎng)人單核細胞株(THP-1)的方法,觀察不同濃度葡萄糖及葡萄糖濃度波動對單核細胞表達CD11b、白介素6和腫瘤壞死因子-α的影響,同時研究滲透壓改變和細胞凋亡是否參與了葡萄糖濃度波動對單核細胞表達炎性因子影響的過程。旨在探討血糖波動在糖尿病大血管病變發(fā)生機制中的作用,從而為糖尿病大血管病變的治療提供理論依據(jù)和實驗基礎(chǔ)。 方法: 1.單核細胞培養(yǎng):取THP-1細胞株,于超凈工作臺內(nèi)解凍復(fù)蘇后
2、,接種于培養(yǎng)瓶中,置于5%CO2培養(yǎng)箱中孵育(37℃)。培養(yǎng)的單核細胞采用胎盤藍染色法計算細胞活率。 2.實驗分組:根據(jù)葡萄糖濃度及其變化分為對照組(5mmol/L)、高葡萄糖組(15mmol/L,)、葡萄糖濃度波動組(5-15mmol/L)、滲透壓控制組(甘露醇濃度5-15mmol/L)。 3.炎性因子檢測:采用流式細胞儀檢測各組單核細胞表面CD11b表達和細胞凋亡,酶聯(lián)免疫吸附法檢測IL-6和TNF-α水平,比較各組
3、差異有無統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果: (1)高葡萄糖組較對照組CD11b、IL-6和TNF-α表達明顯增高。 (2)葡萄糖濃度波動組較高葡萄糖組CD11b、IL-6和TNF-α表達明顯增高。 (3)滲透壓控制組CD11b、IL-6和TNF-α表達介于高葡萄糖組與葡萄糖濃度波動組之間,與高葡萄糖組、葡萄糖濃度波動組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 (4)各組間細胞凋亡無統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論:
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