波動(dòng)性高濃度葡萄糖對(duì)HUVECs粘附分子表達(dá)及NO分泌的影響.pdf

1、目的:對(duì)比研究波動(dòng)性高濃度葡萄糖與恒定性高濃度葡萄糖對(duì)體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子VCAM-1、ICAM-1表達(dá)及NO分泌的影響，從而探討波動(dòng)性高血糖在糖尿病慢性血管并發(fā)癥中的致病機(jī)制?！　》椒?從人臍靜脈中提取并體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)分為4組，分別加入含不同濃度葡萄糖(5.5mmol/L、20mmol/L、5.5/20mmol/L每8小時(shí)輪換1次)及甘露醇(20mmol/L)的條件培養(yǎng)液，每間隔8小時(shí)更換新鮮條件培養(yǎng)液

2、一次，一共作用7天。應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)VCAM-1、ICAM-1基因mRNA的表達(dá)，免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)VCAM-1、ICAM-1蛋白表達(dá)，硝酸還原酶法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液上清中NO的含量?！　〗Y(jié)果:(1)恒定性高濃度葡萄糖(20mmol/L)與波動(dòng)性高濃度葡萄糖(5.5/20mmol/L)作用于人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞7天后，兩組內(nèi)皮細(xì)胞VCAM-1與ICAM-1mRNA的表達(dá)水平均增高。其中VCAM-1mRNA的表達(dá)水平分別

3、為對(duì)照組的151％(P＜0.01)、212％(P＜0.001)，以波動(dòng)性高濃度葡萄糖組增高幅度尤為明顯，與恒定性高濃度葡萄糖組比較，差異有顯著性(P＜0.01)；兩組內(nèi)皮細(xì)胞ICAM-1mRNA的表達(dá)水平均增高，分別為對(duì)照組的173％(P＜0.01)、198％(P＜0.01)，相對(duì)于恒定性高濃度葡萄糖組，波動(dòng)性高濃度葡萄糖組ICAM-1mRNA表達(dá)水平的增高幅度更加明顯，差異有顯著性(P＜0.01)?！　?2)恒定性高濃度葡萄糖(20

4、mmol/L)與波動(dòng)性高濃度葡萄糖(5.5/20mmol/L)作用于人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞7天后，兩組內(nèi)皮細(xì)胞VCAM-1與ICAM-1蛋白的表達(dá)水平均增高。其中VCAM-1蛋白的表達(dá)水平分別為對(duì)照組的222％(P＜0.001)、487％(P＜0.001)，以波動(dòng)性高濃度葡萄糖組增高幅度尤為明顯，與恒定性高糖濃度葡萄組比較，差異有顯著性(P＜0.01)；ICAM-1蛋白的表達(dá)水平分別為對(duì)照組的150％(P＜0.05)、228％(P＜0.01)

5、，相對(duì)于恒定性高濃度葡萄糖組，波動(dòng)性高濃度葡萄糖組ICAM-1蛋白表達(dá)水平的增高幅度更加明顯，差異有顯著性(P＜0.01)?！　?3)經(jīng)恒定性高濃度葡萄糖與波動(dòng)性高濃度葡萄糖處理7天后，兩組內(nèi)皮細(xì)胞分泌NO均減少，分別為對(duì)照組的80％(P＜0.01)、50％(P＜0.01)，其中波動(dòng)性高濃度葡萄糖組內(nèi)皮細(xì)胞分泌NO減少尤為明顯，與恒定性高濃度葡萄糖組比較差異有顯著性(P＜0.01)?！　〗Y(jié)論1、波動(dòng)性高濃度葡萄糖相對(duì)于恒定性高濃度葡