蘋(píng)果多酚的超聲波提取及其抗氧化性研究.pdf

1、本研究以國(guó)光蘋(píng)果為實(shí)驗(yàn)材料，通過(guò)對(duì)蘋(píng)果多酚超聲波提取條件的研究，確立了最佳的提取工藝參數(shù)；探索了大孔樹(shù)脂AB-8對(duì)蘋(píng)果多酚純化的最佳條件，并對(duì)蘋(píng)果多酚的體內(nèi)、體外抗氧化性進(jìn)行了研究，采用DPPH法和2-脫氧-D-核糖法研究了蘋(píng)果多酚對(duì)DPPH自由基和·OH自由基的抑制效果，以期對(duì)蘋(píng)果多酚的抗氧化特性進(jìn)行全面的了解，為其開(kāi)發(fā)利用提供理論依據(jù)。主要試驗(yàn)結(jié)果如下： 1、超聲波提取法具有提取率高、速度快且不改變有效成分的結(jié)構(gòu)等優(yōu)點(diǎn)，其獨(dú)

2、特的機(jī)械振動(dòng)作用和空化作用可打破物質(zhì)的細(xì)胞壁，以使溶媒盡快滲透到細(xì)胞中，溶出其中有效成分。乙醇可作為蘋(píng)果多酚的良性提取溶劑，其超聲波提取的最佳工藝條件為乙醇濃度為60％，料液比1∶6，提取時(shí)間為20min，提取溫度為60℃，提取一次。提取率為2.37g/kgDM。在相同條件下，將超聲波提取方法與普通溶劑法對(duì)比，結(jié)果顯示，超聲波提取效果優(yōu)于普通溶劑法。 2、選取大孔吸附樹(shù)脂AB-8對(duì)蘋(píng)果多酚進(jìn)行分離純化。根據(jù)大孔樹(shù)脂的吸附原理，從

3、大孔樹(shù)脂本身的物理、化學(xué)特征和吸附介質(zhì)性質(zhì)入手，對(duì)解析劑的選擇、上樣濃度、進(jìn)樣速度、洗脫速度進(jìn)行了研究，確定當(dāng)供試液蘋(píng)果多酚濃度為1.648mg/mL，以60％乙醇作洗脫劑，進(jìn)樣速度為1mL/min，洗脫流速為0.5mL/min時(shí)，蘋(píng)果多酚的純度由原來(lái)的0.759％提高到39.98％，提高了52倍，收率可達(dá)52.68％。 3、經(jīng)提純后的多酚進(jìn)行HPLC分析檢測(cè)可知，在總酚酸中，綠原酸含量最高，約占總酚酸物質(zhì)的44.8472％，其

4、次是兒茶酸和鄰苯二酚。其它如對(duì)羥基苯甲酸、沒(méi)食子酸、咖啡酸和阿魏酸等含量較低。在總黃酮中，山奈酚含量最高，其次是槲皮素。其他黃酮如：蘆丁、芹菜素、高島姜素等均未檢出。4、蘋(píng)果多酚具有較好清除自由基的作用。DPPH是一種很穩(wěn)定的以氮為中心的自由基，若受試物能清除它，則提示受試物具有降低羥自由基、烷自由基或過(guò)氧自由基的有效濃度和打斷脂質(zhì)過(guò)氧化鏈反應(yīng)的作用。本試驗(yàn)對(duì)蘋(píng)果多酚清除DPPH自由基的動(dòng)力學(xué)性質(zhì)進(jìn)行了研究，并與茶多酚、葡萄籽多酚、BH

5、T比較其抗氧化能力。結(jié)果表明：蘋(píng)果多酚清除DPPH自由基速度快，其抗氧化能力可與葡萄籽多酚相媲美，具有良好的發(fā)展前景。 5、采用經(jīng)典的2-脫氧-D-核糖法產(chǎn)生·OH自由基，來(lái)檢測(cè)蘋(píng)果多酚的清除能力。結(jié)果顯示：在一定濃度范圍內(nèi)，蘋(píng)果提取物有很強(qiáng)的清除·OH的效果，其最佳濃度范圍為8～10mg/mL，通過(guò)對(duì)比試驗(yàn)表明，蘋(píng)果提取物及葡萄籽提取物清除·OH的效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于茶多酚。結(jié)合高效液相色譜分析，推測(cè)綠原酸為蘋(píng)果多酚中的主要活性物質(zhì)。