實時定量PCR監(jiān)測CML患者伊馬替尼治療后BCR-ABL融合基因變化及耐藥機制的初步探討.pdf

1、目的：動態(tài)監(jiān)測慢性髓細胞白血病慢性期(clironjc phase chronic myeloidleukemia，CML-CP)患者伊馬替尼治療過程中BCR-ABL融合基因變化，以了解CML-CP患者對伊馬替尼治療的反應。對病人服用伊馬替尼治療期間發(fā)生繼發(fā)耐藥的耐藥機制進行初步探討。 對象及方法：采用實時定量多聚酶鏈反應(real time quantitative-polymerase chain reaction，RQ-P

2、CR)的方法對30例服用伊馬替尼的CML-CP患者服藥前、服藥后每三個月的110份骨髓或外周血標本進行了BCR-ABL融合基因mRNA水平連續(xù)監(jiān)測。并將RO-PCR結(jié)果與細胞遺傳學、骨髓象等結(jié)果對比，結(jié)合臨床表現(xiàn)進行結(jié)果分析。對出現(xiàn)繼發(fā)耐藥的患者，采取RQ-PCR的方法，進行MDR1基因表達水平的檢測。同時用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(reverse transcription．polymerase chainreaction，RT-PCR)的

3、方法擴增耐藥患者BCR-ABL融合基因，將擴增出的片段行基因序列測定。 結(jié)果： 1、病人在服用伊馬替尼治療過程中BCR-ABL融合基因mRNA水平呈逐漸下降趨勢，直至檢測不出(<10<'-5>)。5例病人在服用伊馬替尼過程中出現(xiàn)BCR-ABL融合基因mRNA水平較為明顯的波動或維持在較高的水平。其中一例患者在增大伊馬替尼治療劑量的處理后，mRNA水平能再次降低。 2、在BCR-ABL融合基因mRNA水平出現(xiàn)明顯波

4、動的患者中，結(jié)合臨床表現(xiàn)、服藥情況及其它相關(guān)檢查結(jié)果，能診斷為繼發(fā)耐藥的病人為P7和P12患者。 3、對兩例患者BCR-ABL水平達最高點及以后的各時點進行突變點的檢測，未能發(fā)現(xiàn)確切的點突變。對各時點進行MDRI基因的定量檢測，發(fā)現(xiàn)P7在增加藥物劑量以后才出現(xiàn)了多藥耐藥基因(multidrug resistancegene 1，MDRl)水平的逐漸上揚。因此該患者的耐藥機制尚待進一步探究。而P12患者在MDRl增高到一定水平后才

5、出現(xiàn)BCR-ABL水平的升高，我們認為其耐藥可能與該基因的過度表達有關(guān)。 結(jié)論： 1、RQ-PCR用于臨床監(jiān)測伊馬替尼治療后CML-CP患者BCR-ABL融合基因mRNA水平能很好的掌握患者的病情變化，為調(diào)整藥物劑量及治療策略提供了依據(jù)。 2、CML-CP患者服用伊馬替尼治療能很好的抑制腫瘤細胞增殖，在對該藥有效的CML-CP病人中，繼發(fā)耐藥率很低。在服藥過程中出現(xiàn)BCR-ABL融合基因mRNA水平顯著增加，臨床