便秘型腸易激綜合征患者結腸異常表達蛋白質(zhì)的篩選及鑒定.pdf

1、[背景與目的] 腸易激綜合征(IBS)是一種臨床常見的疾病，目前認為IBS是一個功能性腸病，功能的異常必然有其物質(zhì)的基礎，但究竟哪些細胞或分子參與了IBS的病理生理尚不清楚。本研究利用蛋白質(zhì)組學的技術去研究便秘型腸易激綜合征(C-IBS)患者結腸粘膜組織與正常人結腸粘膜組織間蛋白質(zhì)表達的差異，旨在發(fā)現(xiàn)差異蛋白分子，為IBS的發(fā)病機制尋求新的研究方向。 [材料與方法] C-IBS組8例，按羅馬Ⅱ腸易激綜合征診斷標準，男女各半；對照

2、組5例，為健康志愿者。結腸鏡下于回肓部及乙狀結腸各活檢3塊，在含0.1％苯甲基磺酰氟(PMSF)的冰鹽水中洗凈后，立即置于液氮中保存。提取標本蛋白后，按照Gorg A的方法進行雙向凝膠電泳。一向為等電聚焦，二向為十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)對蛋白提取液按照分子量不同進行二維分離。對凝膠進行染色固定，采用硝酸銀染色法，掃描儀掃描獲取圖像。圖像使用Image Master 2D Elite軟件分析配比，篩選出在C-

3、IBS組與對照組之間有明顯表達差異的蛋白質(zhì)點，蛋白質(zhì)鑒定采用質(zhì)譜法。 [結果] 利用雙向電泳技術成功得到各組結腸粘膜組織的2-DE圖譜以及兩組平均膠圖譜，分析平均膠圖譜：對照組顯示蛋白質(zhì)點為834個，C-IBS組為581個，兩組間圖像平均匹配率76.77％。兩組間表達有三倍或以上差異的蛋白有26個，對其中10個蛋白質(zhì)點進行鑒定，獲得了4個在C-IBS組表達上調(diào)的蛋白，分別是：核糖體蛋白SA、鳥嘌呤核苷酸結合蛋白、細胞內(nèi)氯離子通道