宮頸酸性磷酸酶CAP單克隆抗體的制備及CAP在早期宮頸癌篩查中的臨床意義.pdf

1、目的:制備出宮頸酸性磷酸酶蛋白(Cervical acid phosphatase,CAP)的單克隆抗體,并對其相關(guān)的生物學(xué)特性進(jìn)行鑒定;同時(shí)應(yīng)用Mark-Pap試劑盒檢測患者宮頸涂片中的CAP表達(dá),并與TCT(Thinprep cytologic test)制片診斷確診結(jié)果進(jìn)行比較。方法:將CAP蛋白免疫Balb/c雌性小鼠,常規(guī)聚乙二醇介導(dǎo)融合,以間接ELISA方法篩選陽性克隆,有限稀釋法亞克隆篩選單克隆細(xì)胞株,并使用秋水仙素對其核

2、型進(jìn)行鑒定,使用ISO-2鼠源單克隆抗體亞型檢測試劑盒檢測其亞類,并檢測其效價(jià)、特異性等;用Mark-PAP試劑盒檢測CAP蛋白在350例行常規(guī)婦科體檢女性宮頸組織細(xì)胞中的表達(dá),細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)紅色沉淀即為CAP陽性,并與TCT制片診斷確診結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果:篩選出能夠穩(wěn)定分泌抗CAP單抗的雜交瘤細(xì)胞株1B11和3C12,其單克隆抗體的亞型經(jīng)鑒定為IgG2b和IgG1,抗體的效價(jià)在106以上;宮頸酸性磷酸酶在宮頸癌患者組織細(xì)胞中呈陽性表達(dá),而