黨參總皂苷的提取純化及對(duì)大鼠腎缺血再灌注損傷的保護(hù)作用研究.pdf

1、目的:黨參總皂苷(total saponins of Codonopsis,TSC)是黨參中含有的一類重要生物活性物質(zhì),研究表明,黨參總皂苷能防治實(shí)驗(yàn)性高脂血癥,還具有抗腫瘤、抗菌等作用,具有很高的藥用價(jià)值和開(kāi)發(fā)前景。目前,國(guó)內(nèi)對(duì)黨參總皂苷的提取分離純化工藝未見(jiàn)任何系統(tǒng)的報(bào)道。以黨參為原料,對(duì)其提取、純化工藝進(jìn)行研究,探討‘TSC對(duì)大鼠腎缺血再灌注損傷的保護(hù)作用,為黨參資源的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)應(yīng)用提供依據(jù)。
　　 方法:建立香草醛.高氯

2、酸顯色反應(yīng)測(cè)定TSC的分光光度法；采用超聲提取法與傳統(tǒng)的冷浸法、加熱回流提取法進(jìn)行比較,以TSC的得率為指標(biāo),按L9(34)進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn),對(duì)超聲提取工藝進(jìn)行優(yōu)化；通過(guò)比較四種大孔吸附樹(shù)脂(macroporous adsorption resin,MAR)的靜態(tài)吸附量和解吸率,篩選出XAD-16型MAR.,以TSC的含量為指標(biāo),考察XAD-16樹(shù)脂分離、純化TSC的工藝條件；采用結(jié)晶法對(duì)TSC進(jìn)一步純化；通過(guò)測(cè)定三種模型組中腎組織的超氧化

3、物岐化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、丙二醛(malonic dialdehyde,MDA)含量及腎小管上皮細(xì)胞凋亡指數(shù)(apoptosis index,AI),探討TSC對(duì)大鼠腎缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。
　　 結(jié)果:采用香草醛-高氯酸比色法,測(cè)定波長(zhǎng)為554nm,以人參皂苷Re為對(duì)照品,在3～200μg范圍內(nèi)對(duì)照品的量與吸光值呈良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)為0.9996；方法回收率為98.25％,RS

4、D為1.02％。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明超聲提取最佳條件為:甲醇提取,料液比1:20,超聲時(shí)間30min,超聲次數(shù)3次,TSC的平均得率為6.60％。XAD-16型MAR對(duì)純化TSC的動(dòng)態(tài)吸附參數(shù):上柱藥液濃度5.00mg/mL、吸附流速2BV/h、徑高比1:5、上樣體積32mL；動(dòng)態(tài)洗脫參數(shù):先用5BV水洗糖類等水溶性雜質(zhì),再用5BV10％的甲醇洗滌,最后選用水飽和正丁醇進(jìn)行洗脫,收集水飽和正丁醇洗脫部分；純化后總皂苷含量明顯比純化前總皂苷含量高