羊傳染性膿皰病毒F1L基因克隆、序列分析及核酸探針的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本試驗將羊傳染性膿皰病毒(CEV)內蒙古分離株(OV-nm-05)經(jīng)犢牛睪丸細胞增殖培養(yǎng),提取總DNA。參考GeneBank中Orf Virus(Strain NZ2)株FlL基因序列設計一對測序引物、一對診斷引物,應用PER技術特異性地擴增出該毒株的FlL基因的片段,并將其克隆到pGEM-Teasy載體后進行測序,得到該病毒FlL基因序列。測序結果表明所擴增的DNA片段長1005bp個核苷酸,包含了完整的FlL基因的和基因兩端的非編碼

2、區(qū)。應用計算機軟件將測定序列與參考毒株OV-7、Strain NZ2、OV-C2、OV-mi-90、OV-Torino、OV-20的FlL基因序列進行比較。結果表明羊傳染性膿皰病毒內蒙分離株與OV-mi-90同原性最高,達99.1%,與OV-Torino最低,但也為96.3%。說明羊傳染性膿皰病毒內蒙分離株FlL基因與其他參考毒株之間差異不大。 用地高辛標記FlL基因片段,制備成核酸探針,采用斑點雜交法進行特異性和敏感性試驗。結

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