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文檔簡介
1、近年來,胚胎移植的商業(yè)應用和各種胚胎工程等方面的研究和開發(fā)都需要大量的優(yōu)質早期胚胎。胚胎的來源和成本已成為制約胚胎工程實用化的重要因素。把卵母細胞進行體外成熟培養(yǎng)和體外受精后,便可獲得大量廉價的優(yōu)質早期胚胎,既克服了超數排卵技術的局限性,又可滿足科研和生產對胚胎的需求。為獲得大量優(yōu)質廉價的早期胚胎,滿足胚胎工程研究和生產的需要,本試驗進行了山羊卵巢卵母細胞體外成熟培養(yǎng)與孤雌胚培養(yǎng)的研究。 本實驗主要研究透明質酸(HA)對山羊卵母
2、細胞體外成熟和孤雌胚發(fā)育的影響。 實驗第一部分研究了HA對山羊卵母細胞體外成熟的影響。實驗1研究了不HA對山羊卵母細胞無血清培養(yǎng)體系的影響。結果表明,添加一定濃度HA的無血清培養(yǎng)液組比未添加HA的無血清培養(yǎng)液組的卵母細胞成熟率高,當HA濃度在1.0~1.5mg/mL時顯著高于不添加HA的對照組。說明HA可以促進卵母細胞成熟,優(yōu)化無血清培養(yǎng)體系,且HA濃度為1.0~1.5mg/mL時最有利于卵母細胞成熟。實驗2比較了優(yōu)化后的無血清
3、培養(yǎng)液和FBS、EGS兩種血清培養(yǎng)液培養(yǎng)卵母細胞的成熟率,結果表明無血清培養(yǎng)液組的卵母細胞成熟率顯著低于EGS組,但是和FBS組差別不大。 實驗第二部分研究了HA對山羊孤雌胚體外發(fā)育的影響。實驗1研究了不同濃度的HA對孤雌胚發(fā)育的影響。結果表明,HA可以提高早期胚胎發(fā)育的囊胚率,且濃度為1.5mg/mL時效果最好,濃度過高或者過低都不能取得顯著效果。實驗2比較了含有HA的無血清培養(yǎng)液組和FBS組以及OCS組的孤雌胚囊胚率,結果表
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