組蛋白去乙?；敢种苿㏒AHA對(duì)鼠源性B細(xì)胞淋巴瘤的抑制作用及其機(jī)制初步研究.pdf

1、第一部分：SAHA對(duì)鼠源性B細(xì)胞淋巴瘤的抑制作用
　　【目的】研究體外實(shí)驗(yàn)中組蛋白去乙?；敢种苿?SAHA對(duì)鼠源性 B細(xì)胞淋巴瘤A20細(xì)胞的作用。
　　【方法】通過一系列體外實(shí)驗(yàn)來探索SAHA對(duì)A20細(xì)胞的影響：MTT法檢測(cè)SAHA對(duì)A20細(xì)胞增殖的影響；Hoechst33258染色檢測(cè)經(jīng)SAHA處理前后細(xì)胞核形態(tài)的改變；流式細(xì)胞儀檢測(cè)SAHA處理前后細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期分布的變化；透射電鏡TEM觀察SAHA對(duì)A20細(xì)胞自噬

2、的影響。
　　【結(jié)果】 SAHA抑制鼠源性B細(xì)胞淋巴瘤A20細(xì)胞的增殖，其24、48、72小時(shí)的IC50分別是2.461、1.212、1.063μmol/L，呈時(shí)間及劑量依賴性；經(jīng)SAHA處理24小時(shí)后，A20細(xì)胞凋亡率增加、G0/G1期阻滯，呈劑量依賴性；透射電鏡下可見A20細(xì)胞經(jīng)SAHA處理后，胞漿內(nèi)自噬小體增加。
　　【結(jié)論】 SAHA抑制B細(xì)胞淋巴瘤A20細(xì)胞的增殖，促進(jìn)細(xì)胞凋亡及自噬，將細(xì)胞周期阻滯于G0/G1期，

3、起到抗腫瘤的作用。
　　第二部分：SAHA對(duì)A20小鼠移植瘤的抑制作用
　　【目的】研究SAHA對(duì)A20裸鼠移植瘤模型的生長(zhǎng)作用。
　　【方法】建立小鼠 B細(xì)胞淋巴瘤 A20細(xì)胞皮下移植瘤模型，隨機(jī)分組后，分為空白組、安慰劑組、SAHA干預(yù)組，給藥后觀察A20移植瘤模型的生長(zhǎng)情況并描制各組腫瘤生長(zhǎng)曲線。免疫組織化學(xué)檢測(cè)各組皮下移植瘤瘤體內(nèi)血管內(nèi)皮標(biāo)記CD31和增殖細(xì)胞核抗原PCNA表達(dá)的變化。
　　【結(jié)果】SAH

4、A及安慰劑組分別給藥10天后，SAHA干預(yù)組移植瘤瘤體明顯低于空白組與安慰劑組，對(duì)移植瘤模型的生長(zhǎng)具有抑制作用；SAHA干預(yù)組移植瘤瘤體內(nèi)血管內(nèi)皮標(biāo)記CD31和增殖細(xì)胞核抗原PCNA表達(dá)降低。
　　【結(jié)論】SAHA對(duì)A20皮下移植瘤模型的生長(zhǎng)有顯著的抑制作用，可降低CD31、PCNA的表達(dá)，抑制B細(xì)胞淋巴瘤的血管生成及增殖。
　　第三部分：SAHA抑制A20細(xì)胞生長(zhǎng)機(jī)制初步探討
　　【目的】研究SAHA抑制鼠源性B細(xì)胞

5、淋巴瘤A20細(xì)胞生長(zhǎng)可能的信號(hào)通路。
　　【方法】應(yīng)用免疫印跡技術(shù)檢測(cè)SAHA處理前后細(xì)胞內(nèi)增殖、凋亡相關(guān)信號(hào)通路因子AKT、ERK及血管生成影響因子VEGF、HIF-1α的表達(dá)水平變化；檢測(cè)HDAC7下游信號(hào)通路因子Nur77表達(dá)水平的變化，探索SAHA影響B(tài)細(xì)胞淋巴瘤A20細(xì)胞生長(zhǎng)的潛在機(jī)制。
　　【結(jié)果】SAHA抑制A20細(xì)胞AKT、ERK蛋白磷酸化水平的表達(dá)，抑制VEGF、HIF-1α蛋白的表達(dá)，從而抑制A20細(xì)胞增